Γενικές πληροφορίες και τα σχετικά αποτελέσματα

Ιός ευλογιάς της δαμασκηνιάς (PPV) είναι ο αιτιολογικός παράγοντας του Sharka, μια από τις πιο καταστροφικές ασθένειες του είδους Prunus, προκαλώντας σημαντικές αγρονομικές και οικονομικές απώλειες (Chamber et al., 2006). Από την πρώτη του περιγραφή στη Βουλγαρία (Ατανάσοφ, 1932), ο ιός έχει εξαπλωθεί σε μεγάλο μέρος της ευρωπαϊκής ηπείρου, γύρω από τη λεκάνη της Μεσογείου και τη Μέση Ανατολή, Νότια και Βόρεια Αμερική (Χιλή, ΗΠΑ, Καναδάς, και την Αργεντινή) και την Ασία (Καζακστάν, Κίνα και Πακιστάν) (Capote et al., 2006). Η χρήση ανθεκτικών ποικιλιών αντιπροσωπεύει την πιο αποτελεσματική λύση για τον έλεγχο και τη διαχείριση των PPV. Ένα διαγονιδιακό δαμάσκηνο ανθεκτικό στα PPV, Γ5 ("HoneySweet"), έχει αναπτυχθεί (Οι Scorza et al., 1994) αξιοποιώντας τη μετα-μεταγραφική γονιδιακή σίγαση (PTGS), παρέχοντας μια εξαιρετικά αποδοτική και αποτελεσματική αντίσταση έναντι του PPV (Ravelonandro et al., 1997; Οι Scorza et al., 2001). Η αντίσταση έχει αποδειχθεί ανθεκτική και σταθερή για περισσότερα από 10 χρόνια σε δοκιμές πεδίου στη Μαύρη Θάλασσα, Περιφέρειες της Μέσης και Δυτικής Ευρώπης (Οι Malinowski et al., 2006; Zagrai et al., 2008α). Εξάλλου, Ο εμβολιασμός με μόσχευμα δαμάσκηνου C5 με αρκετούς άλλους ιούς στο χωράφι και στο θερμοκήπιο δεν επηρέασε τη σταθερότητα της κατασκευασμένης αντοχής στο PPV για τρεις περιόδους λήθαργου (Zagrai et al., 2008β).

Το διαγονιδιακό C5 ("HoneySweet") Το δαμάσκηνο δεν έχει επηρεάσει τη σύνθεση των πληθυσμών του ιού και καμία επίδραση σε οργανισμούς μη στόχους για παρατεταμένη χρονική περίοδο (Fuchs et al., 2007; Capote et al., 2008; Zagrai et al., 2008γ). Η κίνηση της γύρης «HoneySweet» είναι περιορισμένη. Η συνεργασία με το «HoneySweet» έδωσε νέες ιδέες για τη χρήση διαγονιδιακών δαμάσκηνων ανθεκτικών σε PPV και απέδειξε την έλλειψη αρνητικών περιβαλλοντικών επιπτώσεων αυτών των δαμάσκηνων. Αυτές οι μελέτες δείχνουν τα πλεονεκτήματα αυτής της τεχνολογίας για τον έλεγχο της εξάπλωσης του PPV, να βελτιώσει σημαντικά την παραγωγή δαμάσκηνου σε περιοχές μόλυνσης από PPV, και να βοηθήσει στη διατήρηση της γενετικής ποικιλότητας του δαμάσκηνου σε αυτές τις περιοχές.

Στάδιο Ανάπτυξης

Προκειμένου να πραγματοποιηθούν περαιτέρω δοκιμές πεδίου με διαγονιδιακό δαμάσκηνο C5 και να ληφθούν περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τις γεωπονικές και φαινοτυπικές επιδόσεις και τη συμβατότητα αυτού του γεγονότος υπό την ενδημική περιοχή PPV και τις γεωκλιματικές συνθήκες της Ρουμανίας, θα πρέπει να υποβληθεί νέος φάκελος αίτησης.

Λόγοι για Block / Delay

τον Νοεμβριο 2005 υποβλήθηκε φάκελος αίτησης στο Υπουργείο Περιβάλλοντος σύμφωνα με τη ρουμανική νομοθεσία 214/2002, για τη χορήγηση άδειας διεξαγωγής δοκιμών πεδίου με το C5. Τον Φεβρουάριο 2006 η αίτηση απορρίφθηκε με την αιτιολογία ότι στο μεταξύ εκκρεμούσε προς έγκριση νέος κανονισμός. Σύμφωνα με τον νέο κανονισμό, Οι επιτόπιες δοκιμές απαγορεύτηκαν σε απόσταση 15 χιλιομέτρων από φυσικές προστατευόμενες περιοχές. Ο φάκελος της αίτησης απορρίφθηκε, αν και δεν μπόρεσε να γίνει σύνδεση μεταξύ δαμάσκηνου και υφιστάμενων προστατευόμενων περιοχών στο 10, 11 και 12 km από την προτεινόμενη τοποθεσία πεδίου. Εν τω μεταξύ μια κατάλληλη τοποθεσία χωρίς προστατευμένες περιοχές πιο κοντά από 15 χλμ. εντοπίστηκε και υποβλήθηκε νέος φάκελος αίτησης τον Μάρτιο 2006. Τον Ιούλιο 2006 ο προαναφερόμενος κανονισμός τροποποιήθηκε και το προηγούμενο όριο του 15 χλμ από φυσική προστατευόμενη περιοχή τροποποιήθηκε. Τον Αύγουστο 2006 λάβαμε τις συναινέσεις από τους πέντε φορείς που είναι εξουσιοδοτημένοι να αξιολογήσουν τον φάκελο της αίτησής μας ως εξής:

  • Επιτροπή βιοασφάλειας – ευνοϊκή συγκατάθεση
  • Υπουργείο Γεωργίας – δυσμενής συγκατάθεση. Ο λόγος ήταν η παρουσία δείκτη γονιδίου αντιβιοτικού npt II σύμφωνα με το άρθρο. Όχι. 4 από την Οδηγία 2001/18/ΕΚ
  • Εθνικό Υγειονομικό, Veterinary and Food Safety Authority – favorable consent
  • National Authority for Consumer Protection – considered that the request is outside of its competence.

General response: because the Ministry of Agriculture as beneficiary of this study gave unfavorable consent, the notification request was rejected.

Taking into account that the unfavorable consent was based on a wrong interpretation of art. Όχι. 4 Directive 2001/18/EC that does exclude the use of antibiotic resistance genes for research purposes, but only beginning with 2008, we issued an appeal including the Opinion of European Food Safety Authority (EFSA-Q-2003-109, adopted: 02/04/2004) according to which the npt II gene is considered without adverse effects on human health and the environment and has a safe history of use of more than 13 χρόνια.
Το Υπουργείο Γεωργίας επανεξέτασε τη θέση του μετά την έκκλησή μας και διαβίβασε ευνοϊκή συγκατάθεση στο Υπουργείο Περιβάλλοντος τον Νοέμβριο 2006. Εκείνη την εποχή λάβαμε ευνοϊκές συναινέσεις και από τους πέντε ρυθμιστικούς φορείς αλλά απροσδόκητα, το Υπουργείο Περιβάλλοντος δεν ενέκρινε την επίκληση διαδικαστικού λάθους της ρουμανικής κανονιστικής διαδικασίας. Ακριβώς, το Υπουργείο Περιβάλλοντος έχει επικαλεστεί ότι το Διάταγμα αριθ 49/2000 ορίζει ενδεχόμενη επανεξέταση μιας ήδη εκδοθείσας συγκατάθεσης. Αυτό είναι αντιφατικό γιατί το ίδιο υπουργείο αρχικά έκανε δεκτή την προσφυγή μας και τη διαβίβασε στο Υπουργείο Γεωργίας. Σε αυτή την κατάσταση, το Υπουργείο Περιβάλλοντος πρότεινε να υποβληθεί νέα αίτηση. Τον Φεβρουάριο 2007 υποβλήθηκε νέα αίτηση. Τον Μάιο 2007 όλα τα στάδια της διαδικασίας αξιολόγησης ολοκληρώθηκαν, αλλά η άδεια καθυστέρησε. Τον Ιούλιο 2007, το Υπουργείο Περιβάλλοντος προγραμμάτισε μια πρόσθετη δημόσια περιφερειακή συζήτηση. Τα αποτελέσματα έδειξαν ομόφωνη υποστήριξη από ενδιαφερόμενους παράγοντες.

Παρόλο που η διαδικασία αξιολόγησης ολοκληρώθηκε και παρουσιάστηκαν όλα τα απαραίτητα έγγραφα για έγκριση, το Υπουργείο Περιβάλλοντος καθυστέρησε, χωρίς αιτιολόγηση, τη χορήγηση της άδειας. Τελικά, την εξουσιοδότηση αρ. 4/9 Νοέμβριος 2007 για μια νέα δοκιμή πεδίου με C5 (μέχρι 2011) χορηγήθηκε αλλά επέβαλε περαιτέρω περιορισμούς καθιστώντας σχεδόν αδύνατη τη διεξαγωγή της πειραματικής δοκιμής. Ένας από τους περιορισμούς αναφέρεται στο γεγονός ότι τα δέντρα πρέπει να έχουν προστατευτικό κάλυμμα κατά τη βλαστική περίοδο. Το σκεπτικό της απαίτησης δεν είναι σαφές, δεδομένου ότι οι δοκιμές πεδίου έχουν διεξαχθεί με επιτυχία και με ασφάλεια στην Ισπανία, Πολωνία και Ρουμανία έκτοτε 1996 και οι πτυχές της οικολογικής ασφάλειας αυτών των φυτειών έχουν δημοσιευθεί σε περιοδικά με κριτές και έχουν παρουσιαστεί στο αρχείο αίτησης. Θα πρέπει επίσης να σημειωθεί ότι η συνολική έκταση της «εξουσιοδοτημένης» δοκιμής είναι μόνο 400 m2 που επαρκεί μόνο για περίπου 15 φυτά C5 και 15 φυτά της συμβατικής ποικιλίας.

Προκειμένου να γίνουν πιο λογικοί οι περιορισμοί, υποβάλαμε αναφορά στην Εθνική Υπηρεσία για την Προστασία του Περιβάλλοντος ως Αρμόδια Αρχή και παρουσιάσαμε επιχειρήματα χρησιμοποιώντας δεδομένα αναφοράς και βιβλιογραφία. Η απάντηση της Αρμόδιας Αρχής ήταν να υποβάλουμε νέο φάκελο αίτησης. Αυτό συνεπάγεται πρόσθετο κόστος και είναι χρονοβόρο.

Τα διαφυγόντα οφέλη

Η Sharka έχει σοβαρές αγρονομικές και πολιτικές συνέπειες λόγω τεράστιων οικονομικών απωλειών. Μέτρα όπως η καραντίνα και η εξάλειψη των μολυσμένων δέντρων έχουν αποδειχθεί ανεπαρκή για την πρόληψη της συνεχούς εξάπλωσης του PPV, και σήμερα πολλές χώρες εξασκούν τη συνύπαρξη με την ασθένεια παρά τις μεγάλες απώλειες σε ορισμένες περιπτώσεις. Λόγω της ταχείας εξάπλωσης του PPV από τις αφίδες και της παρουσίας πολλών πιθανών ξενιστών, Η ασθένεια Sharka είναι δύσκολο να εξαλειφθεί από τη στιγμή που έχει εγκατασταθεί σε μια περιοχή. Ως εκ τούτου, Η χρήση ανθεκτικών ποικιλιών αντιπροσωπεύει τη σημαντικότερη στρατηγική για τον έλεγχο της PPV. Η χρήση φυσικών πηγών αντοχής είναι σημαντική για την ανάπτυξη νέων ποικιλιών, αλλά είναι δύσκολο και χρονοβόρο να ενσωματωθεί τέτοια αντοχή στις ποικιλίες πυρηνόκαρπων μέσω συμβατικής αναπαραγωγής.

Η αντοχή του δαμάσκηνου C5 είναι κληρονομήσιμη και μεταδίδεται μέσω των σπόρων και μπορεί εύκολα να επιλεγεί και επομένως το «HoneySweet» μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως γονέας σε προγράμματα αναπαραγωγής για την ταχεία επιλογή νέων ανθεκτικών τύπων (Οι Scorza et al., 1998; Ravelonandro et al., 2002). Εξάλλου, Ο άμεσος μετασχηματισμός επί του παρόντος δημοφιλών ή παραδοσιακών ποικιλιών είναι επί του παρόντος μια επιλογή σε ορισμένα είδη Prunus.

Εικόνες

Φρούτα του C 5 διαγονιδιακός κλώνος (Γλυκό μέλι) ανθεκτικό στο PPV

Κόστος Έρευνας

να ολοκληρωθεί

Αναφορές – υπόβαθρο για μελέτη περίπτωσης

Ζαγκράι Ι., Ραβελονάντρο Μ., Σκόρζα Ρ., Μνοιού Ν., Ζαγκράι Λ., 2008α. Επιτόπια απελευθέρωση διαγονιδιακών δαμάσκηνων στη Ρουμανία. Δελτίο Πανεπιστημίου Γεωπονικών Επιστημών και Κτηνιατρικής Cluj-Napoca, Επιστήμη των Ζώων και Βιοτεχνολογίες. 65:358-365. ISSN 1843-5262.

Ζαγκράι Ι., Κουκούλα Ν., Ραβελονάντρο Μ., Επιμελητήριο Μ., Ζαγκράι Λ., Σκόρζα Ρ., 2008β- Η σίγαση του ιού της ευλογιάς της δαμασκηνιάς των διαγονιδιακών δαμάσκηνων C5 είναι σταθερή υπό πρόκληση εμβολιασμού με ετερόλογους ιούς. Journal of Plant Pathology, 90:63-71.

Ζαγκράι Ι., Ζαγκράι Λ., Ραβελονάντρο Μ., Γαβούρι Ι., Παμφίλ Δ., Φέρεντς Β., Ποπέσκου Ο., Σκόρζα Ρ., Καπότε, Ν. 2008γ. Εκτίμηση περιβαλλοντικών επιπτώσεων των διαγονιδιακών δαμάσκηνων στην ποικιλότητα των πληθυσμών του ιού της ευλογιάς της δαμασκηνιάς. Journal of Horticulture 781: 309-318.

Πρόσθετες αναφορές

Atanassov D., 1932. Δαμασκηνιά ευλογιά. Μια νέα ιογενής ασθένεια. Ann Univ. Σόφιας Σχολή Αγ. Δάσος. 11: 49-69.

Επιμελητήριο Μ., Κουκούλα Ν., Μύρτα Α., Lácer G., 2006. Ιός ευλογιάς της δαμασκηνιάς και εκτιμώμενο κόστος που σχετίζεται με τη νόσο του σάρκα. Δελτίο Δελτίο ΟΕΠΠ/ΕΠΠΟ 36:202-204.

Κουκούλα Ν., Επιμελητήριο Μ., Lácer G., Πίτερ Φ., Platts L.G., Roy A.S., Smith I.M., 2006. Μια ανασκόπηση του ιού της ευλογιάς της δαμασκηνιάς/Α ανασκόπηση του ιού της ευλογιάς της δαμασκηνιάς. Σε: Ταύρος. EPPO/EPPO Δελτίο. 36 (2) : 201-349.

Κουκούλα Ν., Perez-Panades J., Monzo C., Καρμπονέλ Ε., Ουρμπανέγια Α., Σκόρζα Ρ., Ραβελονάντρο Μ., Επιμελητήριο Μ., 2008. Αξιολόγηση της ποικιλότητας και της δυναμικής του ιού της ευλογιάς της δαμασκηνιάς και των πληθυσμών αφίδων σε διαγονιδιακά ευρωπαϊκά δαμάσκηνα υπό μεσογειακές συνθήκες. Διαγονιδιακή Έρευνα 17:367-377

Φουξ Μ., Επιμελητήριο Μ., Κουκούλα Ν., Jelkmann W., Κούντου Τζ., Λαβάλ Β., Martelli G.P., Μιναφρά Α., Πέτροβιτς Ν., Pfieffer P., Pompe-Nocak M., Ραβελονάντρο Μ., Σλνταρέλι Π., Stussi-Garaud C., Vigne E., Ζαγκράι Ι., 2007. Αξιολόγηση ασφάλειας διαγονιδιακών δαμάσκηνων και αμπέλων που εκφράζουν ιικά γονίδια πρωτεΐνης τριχώματος: νέες γνώσεις σχετικά με τις πραγματικές περιβαλλοντικές επιπτώσεις των πολυετών φυτών που έχουν σχεδιαστεί για αντοχή στους ιούς. Journal of Plant Pathology 89: 5-12.

Μαλινόφσκι Τ., Επιμελητήριο Μ., Κουκούλα Ν., Zawadzka B., Gorris M.T., Σκόρζα Ρ., Ραβελονάντρο Μ., 2006. Δοκιμές πεδίου κλώνων δαμάσκηνου που μετασχηματίστηκαν με την πρωτεΐνη περιβλήματος του ιού της ευλογιάς δαμάσκηνου (PPV-CP) γονίδιο. Ασθένεια των φυτών 90:1012-1018.

Ραβελονάντρο Μ., Σκόρζα Ρ., Bachelor J.C., Labonne G., Λέβι Λ., Damsteegt V., Callahan A.M., Dunez J., 1997. Αντίσταση διαγονιδιακών Prunus domestica στη μόλυνση από τον ιό της ευλογιάς της δαμασκηνιάς. Ασθένεια των φυτών, 81: 1231-1235

Ραβελονάντρο Μ., Briard P., Monsion M., Σκόρζα Ρ., 2002. Σταθερή μεταφορά του ιού της ευλογιάς της δαμασκηνιάς (PPV) διαγονίδιο καψιδίου σε σπορόφυτα δύο γαλλικών ποικιλιών «Prunier d'Ente 303» και «Quetsche 2906», και προκαταρκτικά αποτελέσματα των δοκιμασιών πρόκλησης PPV. Πράξη Χορτ. 577:91-96.

Σκόρζα Ρ., Ραβελονάντρο Μ., Callahan A.M., Καρδιά J.M., Φουξ Μ., Dunez J., Γκονσάλβες Δ., 1994. Διαγονιδιακά δαμάσκηνα (Prunus domestica) εκφράζουν το δαμασκηνιά ευλογιά ιός γονίδιο πρωτεΐνης περιβλήματος. Repts φυτικών κυττάρων. 14:18-22.

Σκόρζα Ρ., Κάλαχαν Α., Λέβι Λ., Damsteegt V., Γουέμπ Κ., Ραβελονάντρο Μ., 2001. Σίγαση γονιδίου μετά τη μεταγραφή ιός ευλογιάς της δαμασκηνιάς ανθεκτικό διαγονιδιακό ευρωπαϊκό δαμάσκηνο που περιέχει το δαμασκηνιά ευλογιά γονίδιο πρωτεΐνης περιβλήματος potyvirus. Διαγονιδιακή Έρευνα 10: 201-209.

Σκόρζα Ρ., Κάλαχαν Α., Λέβι Λ., Damsteegt V., Ραβελονάντρο Μ., 1998. Μεταφορά γονιδίων πρωτεΐνης περιβλήματος του potyvirus μέσω υβριδισμού διαγονιδιακών φυτών για παραγωγή δαμάσκηνων ανθεκτικών στον ιό της ευλογιάς της δαμασκηνιάς (Prunus domestica ΜΕΓΑΛΟ.). Journal of Horticulture 472:421-425.

Επιστημονικός Υπεύθυνος

Ζαγκράι Ι., Ο Σταθμός Έρευνας-Ανάπτυξης για την Οπωροκαλλιέργεια Bistrita, Εργαστήριο αναπαραγωγής και ιολογίας., Οδός Drumul Dumitrei Nou, Όχι 3, Μπίστριτσα, Ρουμανία. E-mail: izagrai@yahoo.com