Site-Directed Nuclease (SDN) genoombewerking omvat het gebruik van verschillende DNA-knippende enzymen (nucleasen) die zijn gericht op het knippen van het DNA op een vooraf bepaalde locatie door een reeks verschillende DNA-bindingssystemen. Nadat de snede is gemaakt, het eigen DNA-reparatiemechanisme van de cel herkent de breuk en herstelt de schade, met behulp van een van de twee routes die van nature in cellen aanwezig zijn:
- niet-homologe end-joining (NHEJ): Het geknipte DNA wordt weer samengevoegd, maar terwijl je dit doet, kunnen een paar baseparen worden weggevreten of toegevoegd, wat resulteert in willekeurige kleine deleties (tot 20) of toevoegingen (een paar baseparen) van nucleotiden op de snijplaats.
- homologie-gerichte reparatie (HDR): een donor-DNA dat de gewenste verandering draagt en homologie heeft met de doelplaats wordt gebruikt om deze verandering op de snijplaats te introduceren. Op deze manier kunt u specifieke opzettelijke invoegingen introduceren, wijzigingen of verwijderingen.
Genoombewerking maakt het opzettelijk en nauwkeurig uitschakelen van een ongewenste eigenschap of de (met betrekking tot)introductie van een gewenste eigenschap.
Nuclease-gemedieerde genoombewerkingstechnieken omvatten::