Основне информације и релевантни резултати

Вирус богиња шљиве (ППВ) је узрочник Шарке, једна од најразорнијих болести врсте Прунус, узрокујући значајне агрономске и економске губитке (Цхамбер и др., 2006). Од свог првог описа у Бугарској (Атанасофф, 1932), вирус се проширио на велики део европског континента, око Средоземног басена и Блиског истока, Јужна и Северна Америка (Чиле, САД, Канада, и Аргентина) и Азија (Казахстан, Кина и Пакистан) (Цапоте ет ал., 2006). Употреба отпорних сорти представља најефикасније решење за контролу и управљање ППВ. Трансгена шљива отпорна на ППВ, Ц5 ('ХонеиСвеет'), је развијена (Сцорза ет ал., 1994) искоришћавање пост-транскрипционог утишавања гена (ПТГС), пружајући високо ефикасну и ефективну отпорност на ППВ (Равелонандро и др., 1997; Сцорза ет ал., 2001). Отпор се показао издржљивим и стабилним више од 10 године на теренским огледима у Црном мору, Средње и западноевропске регије (Малиновски и др., 2006; Заграи ет ал., 2008a). Додатно, инокулација Ц5 шљиве са неколико других вируса на пољу иу стакленику није утицала на стабилност пројектоване резистенције на ППВ током три периода мировања (Заграи ет ал., 2008Б).

Трансгени Ц5 ('ХонеиСвеет') шљива није показала никакав утицај на састав популације вируса и нема утицаја на нециљане организме током дужег временског периода (Фуцхс ет ал., 2007; Цапоте ет ал., 2008; Заграи ет ал., 2008Ц). Кретање полена 'ХонеиСвеет' је ограничено. Рад са 'ХонеиСвеет'ом пружио је нове увиде у употребу трансгених шљива отпорних на ППВ и показао недостатак негативних утицаја ових шљива на животну средину. Ове студије указују на предности ове технологије за контролу ширења ППВ-а, to significantly improve plum production in areas of PPV infection, and to help maintain the genetic diversity of plum in these areas.

Фаза развоја

In order to carry out further field trials with C5 transgenic plum and to gain more information relating to the agronomical and phenotype performance and compatibility of this event under PPV endemic area and geo-climatic conditions of Romania, a new application file should be submitted.

Разлози за Блоцк / Делаи

In November 2005 an application file was submitted to the Ministry of Environment according to Romanian Law 214/2002, for granting of an authorization to carry out field trials with C5. In February 2006 the application was rejected on the basis that a new regulation was pending for adoption in the meantime. According to the new regulation, теренска испитивања била су забрањена у кругу од 15 км од заштићених природних подручја. Датотека апликације је одбијена, иако се није могла повући веза између шљиве и постојећих заштићених подручја на 10, 11 и 12 км од наше предложене локације терена. У међувремену погодна локација без заштићених подручја ближе од 15 км је идентификован и нова пријава је поднета у марту 2006. У јулу 2006 горе поменути пропис је измењен и претходно ограничење од 15 км од заштићеног природног подручја је измењена. У августу 2006 добили смо сагласност од пет тела овлашћених да процене наш досије на следећи начин:

  • Комисија за биолошку безбедност – повољан пристанак
  • Министарство пољопривреде – неповољна сагласност. Разлог је присуство нпт ИИ маркера антибиотика гена према чл. бр. 4 из Директиве 2001/18/ЕЦ
  • National Sanitary, Veterinary and Food Safety Authority – favorable consent
  • National Authority for Consumer Protection – considered that the request is outside of its competence.

General response: because the Ministry of Agriculture as beneficiary of this study gave unfavorable consent, the notification request was rejected.

Taking into account that the unfavorable consent was based on a wrong interpretation of art. бр. 4 Directive 2001/18/EC that does exclude the use of antibiotic resistance genes for research purposes, but only beginning with 2008, we issued an appeal including the Opinion of European Food Safety Authority (EFSA-Q-2003-109, adopted: 02/04/2004) according to which the npt II gene is considered without adverse effects on human health and the environment and has a safe history of use of more than 13 године.
Министарство пољопривреде је након нашег апела преиспитало свој став и у новембру доставило повољан сагласност Министарству животне средине. 2006. Тада смо добили повољне сагласности свих пет регулаторних тела, али неочекивано, Министарство животне средине није одобрило позивање на процедуралне грешке румунске регулаторне процедуре. Тачно, Министарство животне средине се позвало да је Правилник бр 49/2000 предвиђа могуће преиспитивање већ издате сагласности. Ово је контрадикторно јер је исто министарство првобитно прихватило наш апел и проследило га Министарству пољопривреде. У овој ситуацији, Министарство животне средине је предложило да се поднесе нова пријава. In February 2007 поднета је нова пријава. У мају 2007 сви кораци поступка евалуације су завршени, али је дозвола одложена. У јулу 2007, Министарство животне средине је планирало додатну јавну регионалну дебату. Резултати су показали једногласну подршку заинтересованих фактора.

Иако је поступак оцењивања завршен и предочена сва потребна документација за одобрење, Министарство животне средине је одложило, без оправдања, давање дозволе. Коначно, овлашћење бр. 4/9 Новембар 2007 за нови теренски оглед са Ц5 (до 2011) је одобрено, али је наметнуло даља ограничења што је експериментално испитивање учинило готово немогућим за извођење. Једно од ограничења односи се на то да стабла морају имати заштитни покривач током вегетативног периода. Образложење овог захтева није јасно пошто су теренска испитивања успешно и безбедно спроведена у Шпанији, Пољској и Румунији од 1996 and the ecological safety aspects of these plantings have been published in peer-reviewed journals and presented in the application file. It should also be noted that the total area of the “authorized” trial is only 400 m2 which is sufficient for only approximately 15 plants of C5 and 15 plants of the conventional cultivar.

In order to make the restrictions more reasonable, we filed a petition to the National Agency for Environmental Protection as Competent Authority and presented arguments using reference data and literature. The response of the Competent Authority was that we should submit a new application file. This implies additional costs and is time consuming.

Неминован Предности

Sharka has serious agronomic and political consequences due to enormous economic losses. Measures such as quarantine and eradication of infected trees have proved to be insufficient to prevent the continuous spread of PPV, and today many countries practice coexistence with the disease in spite of heavy losses in some cases. Due to the rapid spread of PPV by aphids and the presence of many potential hosts, Sharka disease is difficult to eradicate once it has become established in an area. Therefore, the use of resistant cultivars represents the most important strategy to control PPV. The utilization of natural sources of resistance is important for the development of new varieties but it is difficult and lengthy to incorporate such resistance into stone fruits varieties through conventional breeding.

Отпорност Ц5 шљиве је наследна и преноси се кроз семе и може се лако одабрати и стога се „ХонеиСвеет“ може користити као родитељ у програмима оплемењивања за брз одабир нових отпорних типова (Сцорза ет ал., 1998; Равелонандро и др., 2002). Додатно, директна трансформација тренутно популарних или традиционалних сорти је тренутно опција код неких врста Прунуса.

Пицтурес

Плодови Ц 5 трансгени клон (Хонеи Свеет) отпоран на ППВ

Трошкови истраживања

да се заврши

Референце – позадина студије случаја

Заграи И., Равелонандро М., Сцорза Р., Мноиу Н., Заграи Л., 2008a. Пуштање трансгених шљива на терен у Румунији. Билтен Универзитета пољопривредних наука и ветеринарске медицине Клуж-Напока, Наука о животињама и биотехнологије. 65:358-365. ИССН 1843-5262.

Заграи И., Худ Н., Равелонандро М., Комора М., Заграи Л., Сцорза Р., 2008Б- Утишавање вируса богиња шљиве Ц5 трансгених шљива је стабилно под изазовом инокулације хетерологним вирусима. Часопис за патологију биљака, 90:63-71.

Заграи И., Заграи Л., Равелонандро М., Габорејан И., Памфил Д., Ференц Б., Попеску О., Сцорза Р., Цапоте, Н. 2008Ц. Процена утицаја трансгених шљива на животну средину на разноврсност популација вируса богиња шљиве. Часопис за хортикултуру 781: 309-318.

Аддитионал референцес

Атанасов Д., 1932. Шљиве богиње. Нова вирусна болест. Анн Унив. Софијски факултет Аг. Форест. 11: 49-69.

Комора М., Худ Н., Мирта А., Лацер Г., 2006. Вирус богиња шљиве и процењени трошкови повезани са болешћу шарке. Билтен ОЕПП/ЕППО Билтен 36:202-204.

Худ Н., Комора М., Лацер Г., Петтер Ф., Платтс Л.Г., Рои А.С., Смитх И.М., 2006. Преглед Плум пок вируса/Преглед Плум пок вируса. У: Бик. ЕППО/ЕППО Бул. 36 (2) : 201-349.

Худ Н., Перез-Панадес Ј., Монзо Ц., Карбонел Е., Урбанеја А., Сцорза Р., Равелонандро М., Комора М., 2008. Процена диверзитета и динамике популација вируса богиња шљиве и лисних уши у трансгеним европским шљивама у медитеранским условима. Трансгениц Ресеарцх 17:367-377

Фуцхс М., Комора М., Худ Н., Јелкман В., Кунду Ј., Лавал В., Мартели Г.П., Минафра А., Петровић Н., Пфифер П., Помпе-Ночак М., Равелонандро М., Слдарели П., Стусси-Гарауд Ц., Вигне Е., Заграи И., 2007. Процена безбедности трансгених шљива и винове лозе које експримирају гене протеина вирусног омотача: нови увид у стварни утицај на животну средину вишегодишњих биљака пројектованих за отпорност на вирусе. Часопис за патологију биљака 89: 5-12.

Малиновски Т., Комора М., Худ Н., Завадска Б., Горрис М.Т., Сцорза Р., Равелонандро М., 2006. Теренска испитивања клонова шљиве трансформисаних протеином омотача вируса Плум пок вируса (ППВ-ЦП) ген. Плант Дисеасе 90:1012-1018.

Равелонандро М., Сцорза Р., Бацхелор Ј.Ц., Лабон Г., Леви Л., Дамштегт В., Цаллахан А.М., Дунез Ј., 1997. Резистенција трансгених Прунус доместица до инфекције вирусом богиња шљиве. Плант Дисеасе, 81: 1231-1235

Равелонандро М., Бриард П., Монсион М., Сцорза Р., 2002. Стабилан пренос вируса богиња шљиве (ППВ) трансген капсида за саднице две француске сорте 'Пруниер д'Енте 303' и 'Куетсцхе 2906', и прелиминарни резултати тестова изазивања ППВ. Ацта Хорт. 577:91-96.

Сцорза Р., Равелонандро М., Цаллахан А.М., Срце Ј.М., Фуцхс М., Дунез Ј., Гонсалвес Д., 1994. Трансгене шљиве (Прунус доместица) изразити шљиве богиње вирус ген протеина омотача. Рептс биљних ћелија. 14:18-22.

Сцорза Р., Калахан А., Леви Л., Дамштегт В., Веб К., Равелонандро М., 2001. Утишавање гена након транскрипције вирус богиња шљиве отпорна трансгена европска шљива која садржи шљиве богиње ген протеина потивирус омотача. Трансгениц Ресеарцх 10: 201-209.

Сцорза Р., Калахан А., Леви Л., Дамштегт В., Равелонандро М., 1998. Преношење гена протеина потивирусног омотача хибридизацијом трансгених биљака за производњу шљива отпорних на вирус богиња шљиве (Прунус доместица Л.). Часопис за хортикултуру 472:421-425.

Главни истраживач

Заграи И., Истраживачко-развојна станица за бистричку воћарску културу, Лабораторија за узгој и вирусологију., Друмул Думитреи Ноу улица, бр 3, Бистрица, Румунија. Е-маил: изаграи@иахоо.цом