ข้อมูลความเป็นมาและผลที่เกี่ยวข้อง

ไวรัสโรคฝีพลัม (PPV) เป็นตัวแทนสาเหตุ Sharka, หนึ่งในโรคที่ร้ายแรงที่สุดของสายพันธุ์ Prunus, ทำให้สูญเสียทางการเกษตรและเศรษฐกิจที่สำคัญ (บ้าน et al,, 2006). คำอธิบายตั้งแต่ครั้งแรกในบัลแกเรีย (อาตา, 1932), ไวรัสได้แพร่กระจายไปยังส่วนใหญ่ของยุโรปทวีป, รอบทะเลเมดิเตอร์เรเนียนอ่างและตะวันออกกลาง, ภาคใต้และทวีปอเมริกาเหนือ (ชิลี, ประเทศสหรัฐอเมริกา, แคนาดา, และอาร์เจนตินา) และเอเชีย (คาซัคสถาน, จีนและปากีสถาน) (ประทุน, et al, 2006). การใช้พันธุ์ต้านทานหมายถึงวิธีการแก้ปัญหามีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับการควบคุมและการจัดการ PPV. ยีน PPV พลัมทน, C5 (‘HoneySweet’), ได้รับการพัฒนา (Scorza et al,, 1994) การใช้ประโยชน์จากการโพสต์การถอดรหัสยีนสมร (PTGs), การให้ความต้านทานที่มีประสิทธิภาพสูงและมีประสิทธิภาพกับ PPV (Ravelonandro et al,, 1997; Scorza et al,, 2001). ความต้านทานได้พิสูจน์ความทนทานและมีเสถียรภาพมากกว่า 10 ปีในการทดลองภาคสนามในทะเลสีดำ, ภูมิภาคยุโรปกลางและตะวันตก (Malinowski et al,, 2006; Zagrai et al,, 2008a). นอกจากนี้, สินบนการฉีดวัคซีนของ C5 พลัมกับไวรัสอื่น ๆ ในภาคสนามและในเรือนกระจกยังไม่ได้มีอิทธิพลต่อความมั่นคงของความต้านทานการออกแบบมาเพื่อ PPV มากกว่าสามช่วงพักตัว (Zagrai et al,, 2008ข).

ยีน C5 (‘HoneySweet’) พลัมได้แสดงให้เห็นผลกระทบต่อองค์ประกอบของประชากรไวรัสและไม่มีผลกระทบต่อสิ่งมีชีวิตไม่ใช่เป้าหมายในระยะเวลานานของเวลาที่ไม่มี (Fuchs, et al, 2007; ประทุน, et al, 2008; Zagrai et al,, 2008ค). การเคลื่อนไหวของ ‘HoneySweet’ เกสรจะถูก จำกัด. ทำงานร่วมกับ ‘HoneySweet’ ได้ให้ข้อมูลเชิงลึกใหม่ในการใช้พลัม PPV ยีนทนและแสดงให้เห็นถึงการขาดการมีผลกระทบต่อสิ่งแวดล้อมในเชิงลบของพลัมเหล่านี้. การศึกษาเหล่านี้แสดงให้เห็นข้อดีของเทคโนโลยีนี้ในการควบคุมการแพร่กระจายของ PPV, อย่างมีนัยสำคัญปรับปรุงการผลิตพลัมในพื้นที่ของการติดเชื้อ PPV, และเพื่อช่วยรักษาความหลากหลายทางพันธุกรรมของพลัมในพื้นที่เหล่านี้.

ขั้นตอนของการพัฒนา

เพื่อที่จะดำเนินการทดลองภาคสนามต่อไปด้วยพลัมยีน C5 และเพื่อให้ได้รับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการทางการเกษตรและฟีโนไทป์ประสิทธิภาพการทำงานและความเข้ากันได้ของเหตุการณ์นี้อยู่ภายใต้พื้นที่ถิ่น PPV และเงื่อนไขทางภูมิศาสตร์ภูมิอากาศของโรมาเนีย, ไฟล์ใบสมัครใหม่ควรจะส่ง.

เหตุผลในการบล็อค / ล่าช้า

ในเดือนพฤศจิกายน 2005 ไฟล์แอพลิเคชันที่ถูกส่งไปยังกระทรวงสิ่งแวดล้อมตามกฎหมายโรมาเนีย 214/2002, สำหรับการอนุญาตการอนุมัติการดำเนินการทดลองภาคสนามกับ C5. ในเดือนกุมภาพันธ์ 2006 แอพลิเคชันถูกปฏิเสธบนพื้นฐานที่ว่ากฎระเบียบใหม่ที่กำลังรอดำเนินการสำหรับการนำไปใช้ในขณะเดียวกัน. ตามระเบียบใหม่, การทดลองภาคสนามไม่ได้รับอนุญาต within15 กิโลเมตรจากพื้นที่คุ้มครองธรรมชาติ. แฟ้มแอพลิเคชันได้รับการปฏิเสธ, แม้จะไม่มีการเชื่อมต่ออาจจะวาดระหว่างพลัมและที่มีอยู่ในพื้นที่คุ้มครอง 10, 11 และ 12 กม. จากสถานที่เว็บไซต์ของเราที่นำเสนอข้อมูล. ในขณะเดียวกันสถานที่ที่เหมาะสมกับพื้นที่คุ้มครองไม่ใกล้กว่า 15 กม. ที่ถูกระบุและไฟล์ใบสมัครใหม่ถูกส่งมีนาคม 2006. ในเดือนกรกฎาคม 2006 กฎระเบียบดังกล่าวข้างต้นได้รับการแก้ไขและขีด จำกัด ก่อนหน้านี้ 15 กิโลเมตรจากพื้นที่คุ้มครองธรรมชาติถูกแก้ไข. ในเดือนสิงหาคม 2006 เราได้รับความยินยอมจากห้าร่างกายเพิ่มขีดความสามารถในการประเมินไฟล์โปรแกรมของเราดังต่อไปนี้:

  • คณะกรรมการความปลอดภัยทางชีวภาพ - ได้รับความยินยอมที่ดี
  • กระทรวงเกษตร - ได้รับความยินยอมที่ไม่เอื้ออำนวย. เหตุผลคือการปรากฏตัวของ npt II เครื่องหมายยีนยาปฏิชีวนะตามศิลปะ. ไม่. 4 จาก Directive 2001/18 / EC
  • สุขาภิบาลแห่งชาติ, สัตวแพทย์และอาหารปลอดภัย - ได้รับความยินยอมที่ดี
  • แห่งชาติเพื่อการคุ้มครองผู้บริโภค - การพิจารณาว่าขออยู่นอกของความสามารถของตน.

การตอบสนองทั่วไป: เพราะกระทรวงเกษตรเป็นผู้รับผลประโยชน์ของการศึกษานี้ให้ความยินยอมที่ไม่เอื้ออำนวย, แจ้งเตือนถูกปฏิเสธ.

คำนึงถึงว่าได้รับความยินยอมเสียเปรียบก็ขึ้นอยู่กับการตีความที่ไม่ถูกต้องของศิลปะ. ไม่. 4 Directive 2001/18 / EC ที่จะไม่รวมการใช้งานของยีนต้านทานยาปฏิชีวนะเพื่อวัตถุประสงค์ในการวิจัย, แต่เริ่มต้นด้วย 2008, เราออกคำอุทธรณ์รวมทั้งความเห็นของผู้มีอำนาจในยุโรปความปลอดภัยของอาหาร (EFSA-Q-2003-109, บุญธรรม: 02/04/2004) ตามที่ยีน II NPT ถือว่าไม่มีผลกระทบต่อสุขภาพของมนุษย์และสภาพแวดล้อมและมีประวัติความปลอดภัยในการใช้งานมากกว่า 13 ปี.
กระทรวงเกษตรการพิจารณาตำแหน่งดังต่อไปนี้การอุทธรณ์ของเราและส่งความยินยอมเป็นผลดีกับกระทรวงสิ่งแวดล้อมพฤศจิกายน 2006. ในขณะที่เราได้รับความยินยอมอย่างดีจากทั้งห้าหน่วยงานกำกับดูแล แต่ไม่คาดคิด, กระทรวงสิ่งแวดล้อมไม่อนุมัติการเรียกใช้ข้อผิดพลาดในการดำเนินการของขั้นตอนการกำกับดูแลโรมาเนีย. แม่นยำ, กระทรวงสิ่งแวดล้อมได้เรียกว่ากฎหมายไม่มี 49/2000 ไม่กำหนดให้พิจารณาใหม่เป็นไปได้ของความยินยอมที่ออกแล้ว. นี่คือความขัดแย้งเพราะกระทรวงเดียวกันแรกรับอุทธรณ์ของเราและส่งต่อไปยังกระทรวงเกษตร. ในสถานการณ์เช่นนี้, กระทรวงสิ่งแวดล้อมแนะนำให้ส่งใบสมัครใหม่. ในเดือนกุมภาพันธ์ 2007 โปรแกรมใหม่ถูกส่ง. ในเดือนพฤษภาคม 2007 ทุกขั้นตอนของขั้นตอนการประเมินผลสรุป แต่ใบอนุญาตล่าช้า. ในเดือนกรกฎาคม 2007, กระทรวงสิ่งแวดล้อมวางแผนเพิ่มการอภิปรายสาธารณะในระดับภูมิภาค. ผลการศึกษาพบเอกฉันท์สนับสนุนจากปัจจัยที่สนใจ.

แม้ว่าจะมีวิธีการประเมินผลสรุปและเอกสารที่จำเป็นทั้งหมดสำหรับการอนุมัติถูกนำเสนอ, กระทรวงสิ่งแวดล้อมล่าช้า, โดยไม่มีเหตุผล, การให้ใบอนุญาตที่. ในที่สุด, อนุมัติไม่มี. 4/9 พฤศจิกายน 2007 สำหรับการทดลองใช้สนามใหม่ที่มี C5 (จนกระทั่ง 2011) แต่ได้รับการกำหนดข้อ จำกัด ต่อการทดลองการทดลองไปไม่ได้เกือบที่จะดำเนินการ. หนึ่งในข้อ จำกัด ที่หมายถึงความจริงที่ว่าต้นไม้จะต้องมีฝาครอบป้องกันในช่วงเวลาที่พืช. เหตุผลสำหรับความต้องการที่ไม่เป็นที่ชัดเจนตั้งแต่การทดลองภาคสนามได้รับการประสบความสำเร็จและปลอดภัยดำเนินการในสเปน, โปแลนด์และโรมาเนียตั้งแต่ 1996 และด้านความปลอดภัยในระบบนิเวศของพืชพันธุ์เหล่านี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร peer-reviewed และนำเสนอในแฟ้มแอพลิเคชัน. มันก็ควรจะตั้งข้อสังเกตว่าพื้นที่ทั้งหมดของ“ผู้มีอำนาจ” การทดลองเป็นเพียง 400 m2 ซึ่งเพียงพอเพียงประมาณ 15 พืชและ C5 15 พืชของพันธุ์เดิม.

เพื่อที่จะทำให้ข้อ จำกัด ที่เหมาะสมมากขึ้น, เรายื่นคำร้องต่อสำนักงานแห่งชาติเพื่อการคุ้มครองสิ่งแวดล้อมในฐานะเจ้าหน้าที่ผู้มีอำนาจและนำเสนอข้อโต้แย้งโดยใช้ข้อมูลอ้างอิงและวรรณกรรม. การตอบสนองของผู้มีอำนาจคือการที่เราควรส่งไฟล์ใบสมัครใหม่. นี้หมายถึงค่าใช้จ่ายเพิ่มเติมและใช้เวลานาน.

ประโยชน์ที่ได้รับทราบล่วงหน้า

Sharka มีผลทางการเกษตรและการเมืองอย่างจริงจังเนื่องจากการสูญเสียทางเศรษฐกิจอย่างมหาศาล. มาตรการต่าง ๆ เช่นการกักเก็บและการกำจัดของต้นไม้ที่ติดเชื้อมีแนวโน้มว่าจะไม่เพียงพอที่จะป้องกันการแพร่กระจายอย่างต่อเนื่องของ PPV, และในวันนี้หลายประเทศฝึกการอยู่ร่วมกันกับโรคทั้งๆที่ขาดทุนหนักในบางกรณี. เนื่องจากการแพร่กระจายอย่างรวดเร็วของ PPV โดยเพลี้ยและการปรากฏตัวของครอบครัวที่มีศักยภาพมากมาย, โรค Sharka เป็นเรื่องยากที่จะขจัดความเมื่อมันได้กลายเป็นที่ยอมรับในพื้นที่. ดังนั้น, การใช้พันธุ์ต้านทานหมายถึงกลยุทธ์ที่สำคัญที่สุดในการควบคุม PPV. การใช้ประโยชน์จากแหล่งน้ำธรรมชาติของความต้านทานเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการพัฒนาพันธุ์ใหม่ แต่มันเป็นเรื่องยากและมีความยาวที่จะรวมความต้านทานเช่นผลไม้เข้าไปในหินพันธุ์ผ่านการปรับปรุงพันธุ์ธรรมดา.

ความต้านทานของ C5 พลัมเป็นมรดกตกทอดและส่งผ่านเมล็ดพันธุ์และสามารถเลือกได้อย่างง่ายดายและดังนั้นจึง ‘HoneySweet’ สามารถนำมาใช้เป็นพ่อแม่ในโปรแกรมการปรับปรุงพันธุ์อย่างรวดเร็วเลือกประเภททนใหม่ (Scorza et al,, 1998; Ravelonandro et al,, 2002). นอกจากนี้, การเปลี่ยนแปลงโดยตรงของสายพันธุ์ที่นิยมในขณะนี้หรือดั้งเดิมในปัจจุบันเป็นตัวเลือกในบางชนิด Prunus.

รูปภาพ

ผลไม้ของ C 5 โคลนยีน (น้ำผึ้งหวาน) ทนต่อ PPV

ค่าใช้จ่ายในการวิจัย

จะเสร็จสมบูรณ์

อ้างอิง – พื้นหลังกรณีศึกษา

Zagrai I., Ravelonandro เมตร, Scorza อาร์, Mnoiu N., Zagrai ลิตร, 2008a. ปล่อยฟิลด์ของพลัมดัดแปรพันธุกรรมในโรมาเนีย. แถลงการณ์ของมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์และสัตวแพทยศาสตร์ Cluj-Napoca, สัตวศาสตร์และวิทยาการ. 65:358-365. ISSN 1843-5262.

Zagrai I., ประทุน N., Ravelonandro เมตร, นาย Cambra, Zagrai ลิตร, Scorza อาร์, 2008ข- สมรพลัมโรคฝีไวรัสของพลัมยีน C5 มีเสถียรภาพภายใต้การฉีดวัคซีนท้าทายกับไวรัส heterologous. วารสารโรคพืช, 90:63-71.

Zagrai I., Zagrai ลิตร, Ravelonandro เมตร, Gaboreanu I., Pamfil D., B เฟเรนซ, โปเปสคุทุม, Scorza อาร์, หลังคารถ, ยังไม่มีข้อความ. 2008ค. การประเมินผลกระทบด้านสิ่งแวดล้อมของพันธุ์ลูกพลัมด้วยความหลากหลายของพลัมโรคฝีประชากรไวรัส. Acta Horticultuarae 781: 309-318.

อ้างอิงเพิ่มเติม

Atanassov D., 1932. พลัมโรคฝี. โรคไวรัสตัวใหม่. แอน Univ. โซเฟียคณะ Ag. SILV. 11: 49-69.

นาย Cambra, ประทุน N., Myrta A., Llácerกรัม, 2006. ไวรัสโรคฝีพลัมและค่าใช้จ่ายโดยประมาณที่เกี่ยวข้องกับโรค sharka. Bulletin ผ / สนพ Bulletin 36:202-204.

ประทุน N., นาย Cambra, Llácerกรัม, Petter เอฟ, Platts L.G., รอย A.S., สมิ ธ I.M., 2006. ความคิดเห็นของไวรัสโรคฝีพลัม / ความคิดเห็นของไวรัสโรคฝีพลัม. ใน: วัว. ผ / สนพกระทิง. 36 (2) : 201-349.

ประทุน N., Perez-Panades เจ, Monzo ซี, Carbonell อี, A. Urbaneja, Scorza อาร์, Ravelonandro เมตร, นาย Cambra, 2008. การประเมินผลของความหลากหลายและการเปลี่ยนแปลงของเชื้อไวรัสโรคฝีพลัมและเพลี้ยประชากรในพลัมยุโรปยีนภายใต้เงื่อนไขเมดิเตอร์เรเนียน. วิจัยดัดแปรพันธุกรรม 17:367-377

Fuchs เมตร, นาย Cambra, ประทุน N., Jelkmann ดับบลิว, Kundu เจ, ลาวาลโวลต์, เทจีพี, Minafra A., Petrovic N., Pfieffer พี, ปั๊ม Nocak นาย, Ravelonandro เมตร, Sldarelli พี, Stussi-Garaud ซี, Vigne อี, Zagrai I., 2007. การประเมินความปลอดภัยของพลัมองุ่นดัดแปรพันธุกรรมและการแสดงยีนโปรตีนของไวรัสเสื้อ: ข้อมูลเชิงลึกใหม่เข้าสู่ผลกระทบต่อสิ่งแวดล้อมที่แท้จริงของพืชยืนต้นออกแบบให้ต้านทานไวรัส. วารสารโรคพืช 89: 5-12.

Malinowski ตัน, นาย Cambra, ประทุน N., Zawadzka บี, Gorris M.T., Scorza อาร์, Ravelonandro เมตร, 2006. การทดลองภาคสนามของโคลนพลัมเปลี่ยนกับพลัมไวรัสโรคฝีโปรตีนเสื้อ (PPV CP) ยีน. โรคพืช 90:1012-1018.

Ravelonandro เมตร, Scorza อาร์, ปริญญาตรี J.C., Labonne กรัม, Levy ลิตร, Damsteegt โวลต์, สิทธิชัย A.M., Dunez เจ, 1997. ความต้านทานของยีน Prunus domestica เพื่อบ๊วยติดเชื้อไวรัสโรคฝี. โรคพืช, 81: 1231-1235

Ravelonandro เมตร, Briard พี, Monsion เมตร, Scorza อาร์, 2002. บริการรถรับส่งที่มั่นคงของไวรัสโรคฝีพลัม (PPV) capsid ยีนต้นกล้าของฝรั่งเศสสองพันธุ์ ‘Prunier d'Ente 303’ และ ‘Quetsche 2906’, และผลการศึกษาเบื้องต้นของ PPV ท้าทายการตรวจ. Acta Hort. 577:91-96.

Scorza อาร์, Ravelonandro เมตร, สิทธิชัย A.M., cordis J.M., Fuchs เมตร, Dunez เจ, ก้านขด D., 1994. พลัมดัดแปรพันธุกรรม (Prunus domestica) แสดง โรคฝีพลัม ไวรัส เสื้อยีนโปรตีน. Repts เซลล์พืช. 14:18-22.

Scorza อาร์, สิทธิชัย A., Levy ลิตร, Damsteegt โวลต์, เวบบ์เค, Ravelonandro เมตร, 2001. โพสต์ถอดรหัสสมรยีน ไวรัสโรคฝีพลัม ทนพลัมยุโรปดัดแปรพันธุกรรมที่มี โรคฝีพลัม potyvirus ยีนโปรตีนเสื้อ. วิจัยดัดแปรพันธุกรรม 10: 201-209.

Scorza อาร์, สิทธิชัย A., Levy ลิตร, Damsteegt โวลต์, Ravelonandro เมตร, 1998. การถ่ายโอนยีนโปรตีน potyvirus เสื้อผ่านการผสมข้ามพันธุ์ของพืชดัดแปรพันธุกรรมในการผลิตพลัมพลัมทนโรคฝีไวรัส (Prunus domestica ลิตร). Acta Horticulturae 472:421-425.

วิจัยหลัก

Zagrai I., การวิจัยและพัฒนาสถานีสำหรับผลไม้ Bistrita, การปรับปรุงพันธุ์และห้องปฏิบัติการไวรัสวิทยา, ใหม่ Dumitreei ทางถนน, ไม่ 3, Bistrita, โรมาเนีย. E-mail: izagrai@yahoo.com