Site-Directed nuclease (SDN) chỉnh sửa gen liên quan đến việc sử dụng các enzym DNA cắt khác nhau (nucleases) được đạo diễn để cắt DNA tại một địa điểm được xác định trước bởi một loạt các hệ thống ràng buộc DNA khác nhau. Sau khi cắt được làm, cơ chế sửa chữa DNA riêng của tế bào nhận giờ nghỉ và sửa chữa những thiệt hại, sử dụng một trong hai con đường có mặt tự nhiên trong tế bào:
- không tương đồng cuối cùng gia nhập (NHEJ): DNA cắt được tái gia nhập, nhưng khi làm điều này một vài basepairs chưa ăn đi hoặc thêm vào dẫn đến xóa bỏ nhỏ ngẫu nhiên (lên đến 20) hoặc bổ sung (một vài basepairs) nucleotide tại vị trí cắt.
- sửa chữa tương đồng-đạo (HDR): một DNA nhà tài trợ mang sự thay đổi mong muốn và có tương đồng với trang web mục tiêu được sử dụng để giới thiệu sự thay đổi này tại vị trí cắt. Bằng cách này bạn có thể giới thiệu chèn cố ý cụ thể, thay đổi hoặc xóa.
chỉnh sửa bộ gen cho phép gõ có chủ ý và chính xác ra khỏi một đặc điểm không mong muốn hoặc (tái)giới thiệu một đặc điểm mong muốn.
Nuclease trung gian kỹ thuật chỉnh sửa bộ gen bao gồm: