Antecedentes y resultados pertinentes

Plum pox virus (PPV) es el agente causal de la Sharka, una de las enfermedades más devastadoras de la especie Prunus, causando importantes pérdidas económicas y agronómicas (Cámara et al., 2006). Desde su primera descripción en Bulgaria (Atanasoff, 1932), el virus se ha extendido en gran parte del continente europeo, alrededor de la cuenca del Mediterráneo y Oriente Medio, Sur y América del Norte (Chile, EE.UU., Canadá, y Argentina) y Asia (Kazajstán, China y Pakistán) (Capote et al., 2006). El uso de cultivares resistentes representa la solución más eficaz para el control y la gestión de PPV. Una ciruela resistentes PPV transgénico, C5 ('Dulce miel'), ha sido desarrollado (Scorza et al., 1994) la explotación de post-transcripcional silenciamiento génico (PTGS), proporcionando una resistencia altamente eficiente y eficaz contra el PPV (Ravelonandro et al., 1997; Scorza et al., 2001). La resistencia ha demostrado ser duradera y estable durante más de 10 años en ensayos de campo en el Mar Negro, las regiones central y occidental de Europa (Malinowski et al., 2006; Zagrai et al., 2008un). Además, injerto inoculación de ciruela C5 con varios otros virus en el campo y en el invernadero no han influido en la estabilidad de la resistencia diseñado para PPV más de tres períodos de latencia (Zagrai et al., 2008b).

El C5 transgénico ('Dulce miel') ciruela ha mostrado ningún impacto en la composición de las poblaciones de virus y ningún impacto en los organismos no objetivo durante un período prolongado de tiempo (Fuchs et al., 2007; Capote et al., 2008; Zagrai et al., 2008c). El movimiento del polen 'HoneySweet' está limitado. Trabajar con 'HoneySweet' ha proporcionado nuevos conocimientos sobre el uso de PPV ciruelos transgénicos resistentes y demostró la falta de impactos ambientales negativos de estas ciruelas. Estos estudios indican las ventajas de esta tecnología para controlar la propagación de PPV, para mejorar significativamente la producción de ciruela en áreas de infección de PPV, y para ayudar a mantener la diversidad genética de ciruela en estas áreas.

Etapa de Desarrollo

Con el fin de llevar a cabo más pruebas de campo con el ciruelo transgénico C5 y para obtener más información relativa al comportamiento agronómico y el fenotipo y la compatibilidad de este evento bajo el área endémica de PPV y las condiciones geo-climáticas de Rumania, un nuevo expediente de solicitud debe presentarse.

Razones para Bloquear / Delay

En noviembre 2005 un expediente de solicitud se presentó al Ministerio de Medio Ambiente de acuerdo con la ley rumana 214/2002, para la concesión de una autorización para llevar a cabo pruebas de campo con C5. En febrero 2006 la solicitud fue rechazada sobre la base de que una nueva regulación se encuentra pendiente de aprobación en el ínterin. De acuerdo con la nueva normativa, ensayos de campo se les prohibió within15 km de áreas naturales protegidas. El archivo de aplicación fue rechazada, aunque no hay conexión podría hacerse entre ciruela y las áreas protegidas existentes en 10, 11 y 12 km de nuestra ubicación del sitio de campo que proponen. Mientras tanto, un lugar adecuado sin áreas protegidas más cerca de lo 15 Se identificó km y un nuevo archivo de la aplicación se presentó en marzo 2006. En julio 2006 el reglamento mencionado anteriormente se modificó y el límite anterior de 15 km del área natural protegida se modificó. En agosto 2006 hemos recibido los consentimientos de los cinco organismos habilitados para evaluar nuestro archivo de la aplicación de la siguiente:

  • Bioseguridad comisión - consentimiento favorable
  • Ministerio de Agricultura - consentimiento desfavorable. La razón fue la presencia de npt II gen marcador antibiótico de acuerdo con el arte. no. 4 de la Directiva 2001/18 / CE
  • Sanitaria nacional, Veterinaria y Seguridad Alimentaria - consentimiento favorable
  • Autoridad Nacional de Protección al Consumidor - considera que la solicitud está fuera de su competencia.

respuesta general: debido a que el Ministerio de Agricultura como beneficiario de este estudio dieron su consentimiento desfavorable, la solicitud de notificación fue rechazada.

Teniendo en cuenta que el consentimiento desfavorable se basa en una interpretación errónea del arte. no. 4 Directiva 2001/18 / CE que sí excluye el uso de genes de resistencia a antibióticos con fines de investigación, pero sólo a partir de 2008, Hemos emitido un recurso hasta que el dictamen de la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA-Q-2003-109, adoptado: 02/04/2004) según el cual el gen npt II se considera sin efectos adversos en la salud humana y el medio ambiente y tiene una historia de uso seguro de más de 13 años.
El Ministerio de Agricultura reconsiderado su posición después de nuestra apelación y transmite un consentimiento favorable al Ministerio de Medio Ambiente de noviembre 2006. En ese momento se obtuvo su consentimiento favorables de los cinco organismos reguladores, pero inesperadamente, el Ministerio de Medio Ambiente no aprobó la invocación de un error de procedimiento del procedimiento de reglamentación rumana. Precisamente, el Ministerio de Medio Ambiente ha invocado que la ordenanza no se 49/2000 sí estipula una posible reconsideración de una autorización ya expedida. Esto es contradictorio porque el mismo ministerio inicialmente aceptó nuestro llamamiento y lo remitió al Ministerio de Agricultura. En esta situación, el Ministerio de Medio Ambiente sugirió a presentar una nueva solicitud. En febrero 2007 Se presentó una nueva solicitud. En Mayo 2007 todos los pasos del procedimiento de evaluación se llegó a la conclusión, pero el permiso se retrasó. En julio 2007, el Ministerio de Medio Ambiente cepillada un debate regional pública. Los resultados mostraron el apoyo unánime de los factores interesados.

Aunque el procedimiento de evaluación se concluyó y se presentaron todos los documentos necesarios para su aprobación, el Ministerio de Medio Ambiente retardada, sin justificación, la concesión del permiso. Finalmente, sin la autorización. 4/9 Noviembre 2007 para una nueva prueba de campo con C5 (hasta 2011) fue concedida, pero impone restricciones adicionales que hacen la prueba experimental casi imposible de llevar a cabo. Una de las restricciones se refiere al hecho de que los árboles deben tener una cubierta protectora durante el período vegetativo. El fundamento de la exigencia no es clara, ya que las pruebas de campo han sido con éxito y seguridad realizados en España, Polonia y Rumania desde 1996 y los aspectos de seguridad ecológicas de estas plantaciones han sido publicados en revistas revisadas por pares y presentado en el expediente de solicitud. También hay que señalar que el área total de la prueba "autorizado" es solamente 400 m2, que es suficiente para que sólo aproximadamente 15 plantas de C5 y 15 plantas de la variedad convencional.

Con el fin de hacer que las restricciones más razonable, hemos presentado una petición a la Agencia Nacional de Protección del Medio Ambiente como autoridad competente y se presentaron argumentos a partir de datos de referencia y literatura. La respuesta de la autoridad competente era que deberíamos presentar un nuevo expediente de solicitud. Esto implica costes adicionales y consume mucho tiempo.

Beneficios percibidos

Sharka tiene graves consecuencias agronómicas y políticos debido a enormes pérdidas económicas. Medidas como la cuarentena y erradicación de los árboles infectados han demostrado ser insuficientes para prevenir la propagación continua de PPV, y hoy en día muchos países practican la convivencia con la enfermedad a pesar de las fuertes pérdidas en algunos casos. Debido a la rápida propagación de PPV por los áfidos y la presencia de muchos posibles anfitriones, enfermedad sharka es difícil de erradicar una vez que se ha establecido en un área. Por lo tanto, el uso de cultivares resistentes representa la estrategia más importante para controlar PPV. La utilización de las fuentes naturales de resistencia es importante para el desarrollo de nuevas variedades pero es difícil y largo para incorporar dicha resistencia en variedades de frutas de piedra a través de cría convencional.

La resistencia de ciruela C5 es heredable y transmitida a través de la semilla y se puede seleccionar fácilmente y por lo tanto 'HoneySweet' se puede utilizar como una matriz en programas de reproducción para seleccionar rápidamente nuevos tipos resistentes (Scorza et al., 1998; Ravelonandro et al., 2002). Además, transformación directa de los cultivares actualmente populares o tradicionales es actualmente una opción en algunas especies de Prunus.

Fotos

Frutos de C 5 clon transgénico (Dulce miel) resistente a PPV

Costo de la Investigación

para ser completado

Referencias – fondo de estudio de caso

Zagrai I., Ravelonandro M., Scorza R., Mnoiu N., Zagrai L., 2008un. liberación en el campo de ciruelos transgénicos en Rumania. Boletín de la Universidad de Ciencias Agrícolas y Medicina Veterinaria de Cluj-Napoca, Ciencia y Biotecnología Animal. 65:358-365. ISSN 1843-5262.

Zagrai I., Capote N., Ravelonandro M., Cámara M., Zagrai L., Scorza R., 2008b- silenciamiento Plum pox virus de ciruelos transgénicos C5 es estable bajo la inoculación desafío con virus heterólogos. Diario de Patología Vegetal, 90:63-71.

Zagrai I., Zagrai L., Ravelonandro M., Gaboreanu I., Pamfil D., B. Ferencz, Popescu O., Scorza R., Capota, norte. 2008c. Evaluación de Impacto Ambiental de transgénicos Ciruelas sobre la diversidad de Plum pox virus de las poblaciones. Acta Horticultuarae 781: 309-318.

referencias adicionales

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Capote N., Cámara M., G. Llácer, Petter F., Platts L.G., Roy A. S., I. M. Smith, 2006. Una revisión de Plum pox virus / Une revue du virus de la viruela del ciruelo. En: Toro. OEPP / EPPO Bull. 36 (2) : 201-349.

Capote N., Pérez-Panades J., Monzo C., E. Carbonell, Urbaneja A., Scorza R., Ravelonandro M., Cámara M., 2008. Evaluación de la diversidad y la dinámica de Plum pox virus y áfidos en las poblaciones europeas ciruelos transgénicos en condiciones mediterráneas. La investigación transgénica 17:367-377

Fuchs M., Cámara M., Capote N., Jelkmann W., Kundu J., Laval V., G. P. Martelli, Minafra A., Petrovic N., P. Pfeiffer, El Sr. bomba Nocak, Ravelonandro M., Sldarelli P., Stussi-Garaud C., Vigne E., Zagrai I., 2007. evaluación de la seguridad de los ciruelos transgénicos y vides que expresan genes de la proteína de la cubierta viral: nuevos conocimientos sobre el impacto ambiental real de las plantas perennes diseñadas para resistencia del virus. Diario de Patología Vegetal 89: 5-12.

Malinowski T., Cámara M., Capote N., Zawadzka B., Gorris M. T., Scorza R., Ravelonandro M., 2006. Los ensayos de campo de los clones de ciruela transforman con la proteína de la cubierta Plum pox virus (PPV-CP) gene. Enfermedades de las Plantas 90:1012-1018.

Ravelonandro M., Scorza R., Licenciado J. C., Labonne G., Levy L., Damsteegt V., Callahan A.M., Dunez J., 1997. La resistencia de los transgénicos Prunus domestica a la infección por virus de la viruela del ciruelo. Enfermedades de las Plantas, 81: 1231-1235

Ravelonandro M., Briard P., Monsion M., Scorza R., 2002. transferencia estable del virus de la viruela del ciruelo (PPV) cápside transgén a las plántulas de 'Prunier de Ente 303' dos cultivares franceses y 'Quetsche 2906', y los resultados preliminares de los ensayos de desafío PPV. Acta Hort. 577:91-96.

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Scorza R., Callahan A., Levy L., Damsteegt V., Ravelonandro M., 1998. La transferencia de genes de proteína de cubierta potyvirus través de la hibridación de plantas transgénicas para producir ciruelos resistentes a los virus de la viruela del ciruelo (Prunus domestica L.). Acta Horticulturae 472:421-425.

Investigador Principal

Zagrai I., Estación de Investigación y Desarrollo de las frutas Bistrita, Cultivo y laboratorio de Virología., Nueva calle de sentido Dumitreei, no 3, Bistrita, Rumania. E-mail: izagrai@yahoo.com