Nuclease dirixido polo sitio (SDN) A edición do xenoma implica o uso de diferentes encimas que cortan o ADN (nucleases) que están dirixidos a cortar o ADN nun lugar predeterminado mediante unha serie de diferentes sistemas de unión ao ADN. Despois de facer o corte, o propio mecanismo de reparación do ADN da célula recoñece a rotura e repara o dano, utilizando unha das dúas vías que están presentes naturalmente nas células:
- unión terminal non homóloga (NHEJ): O ADN cortado reúnese, pero ao facer isto, algúns pares de bases poden ser devorados ou engadidos, resultando en pequenas eliminacións aleatorias (ata 20) ou engadidos (uns pares de bases) de nucleótidos no lugar de corte.
- reparación dirixida por homoloxía (HDR): utilízase un ADN doador que leva o cambio desexado e ten homoloxía co sitio diana para introducir este cambio no lugar de corte.. Deste xeito podes introducir insercións intencionadas específicas, cambios ou eliminacións.
A edición do xenoma permite a eliminación intencionada e precisa dun trazo indesexable ou do (re)introdución dun trazo desexado.
As técnicas de edición do xenoma mediadas por nuclease inclúen: