Impormasyon ng background at may-katuturang mga resulta

Kaakit-akit pox virus (PPV) ay ang pananahilan ahente ng Sharka, isa sa mga pinaka-nagwawasak sakit ng Prunus species, nagiging sanhi mahalaga agronomic at pang-ekonomiyang pagkalugi (House et al., 2006). Dahil ang unang paglalarawan nito sa Bulgaria (Atanasoff, 1932), ang virus ay kumalat sa isang malaking bahagi ng European kontinente, sa paligid ng Mediterranean basin at Gitnang Silangan, Timog at Hilagang Amerika (Tsile, Amerika, Kanada, at Argentina) at Asya (Kasakstan, Tsina at Pakistan) (Kapote militar et al., 2006). Ang paggamit ng mga lumalaban cultivars ay kumakatawan sa mga pinaka-epektibong solusyon para sa PPV kontrol at pamamahala. Ang isang transgenic PPV lumalaban kaakit-akit, C5 ('HoneySweet'), Na-develop (Scorza et al., 1994) paggamit post-transcriptional gene silencing (PTGS), pagbibigay ng isang lubos na mahusay at epektibong paglaban laban sa PPV (Ravelonandro et al., 1997; Scorza et al., 2001). Pagtutol ay di-napatutunayang matibay at matatag para sa higit sa 10 taon sa mga pagsubok sa field sa Black Sea, Mga rehiyon Middle at Western European (Malinowski et al., 2006; Zagrai et al., 2008isang). At saka, pangunguwalta-pagbabakuna ng C5 kaakit-akit na may maraming iba pang mga virus sa patlang at sa greenhouse ay hindi naiimpluwensyahan ang katatagan ng ininhinyero paglaban sa PPV sa paglipas ng tatlong yugto ng antok (Zagrai et al., 2008b).

Ang transgenic C5 ('HoneySweet') nagpakita ng kaakit-akit walang epekto sa mga bahagi ng mga virus populasyon at walang epekto sa non-target na mga organismo sa isang pinalawig na tagal ng panahon (Fuchs et al., 2007; Kapote militar et al., 2008; Zagrai et al., 2008c). Movement ng 'HoneySweet' pollen ay limitado. Makipagtulungan sa 'HoneySweet' ay nagbigay ng bagong pananaw sa ang paggamit ng PPV lumalaban transgenic plums at nagpakita ang kakulangan ng mga negatibong mga epekto sa kapaligiran ng mga plums. Ang mga pag-aaral ipahiwatig ang mga bentahe ng ito teknolohiya upang makontrol ang pagkalat ng PPV, upang makabuluhang mapabuti kaakit-akit produksyon sa lugar ng PPV impeksiyon, at upang matulungan mapanatili ang genetic pagkakaiba-iba ng kaakit-akit sa mga lugar na.

Stage ng Development

Upang isakatuparan ang karagdagang mga pagsubok na field sa C5 transgenic kaakit-akit at upang makakuha ng karagdagang impormasyon na may kaugnayan sa agronomical at Penotipo pagganap at pagkakatugma ng kaganapang ito sa ilalim ng PPV katutubo na lugar at kundisyon geo-klimatiko ng Romania, Dapat isumite ang isang bagong file ng application.

Mga dahilan para sa I-block ang / Pagkaantala

Noong Nobyembre 2005 isang file ng application ay isinumite sa Ministri ng Kapaligiran ayon sa Batas Romanian 214/2002, para sa pagbibigay ng pahintulot upang isakatuparan ang mga pagsubok sa field sa C5. Noong Pebrero 2006 ang application ay tinanggihan sa batayan na ang isang bagong regulasyon ay nakabinbin para sa pag-aampon sa habang panahon. Ayon sa bagong regulasyon, mga pagsubok sa field ay ipinagbabawal within15 km mula sa likas na protektadong mga lugar. Ang file na application ay tinanggihan, kahit na walang koneksyon ay maaaring iguguhit sa pagitan ng kaakit-akit at umiiral na protektadong mga lugar sa 10, 11 at 12 km mula sa aming mga lokasyon ipinanukalang field site. Samantala isang angkop na lokasyon na walang mga protektadong mga lugar na mas malapit kaysa sa 15 km ay nakilala at isang bagong file ng application ay isinumite Marso 2006. Noong Hulyo 2006 ang nasa itaas nabanggit regulasyon ay binagong at naunang limitasyon ng 15 km mula sa natural na protektado na lugar ay sinususugan. Noong Agosto 2006 Natanggap namin ang pahintulot mula sa limang mga katawan empowered upang masuri ang aming mga file ng application tulad ng sumusunod:

  • Biosafety komisyon - kanais-nais na pahintulot
  • Ministry of Agriculture - nakapinsala pahintulot. Ang dahilan dito ay ang pagkakaroon ng npt II antibyotiko gene marker ayon sa art. huwag. 4 mula sa Directive 2001/18 / EC
  • Pambansang mabuti sa kalusugan, Beterinaryo at Food Safety Authority - kanais-nais na pahintulot
  • Pambansang Awtoridad para Proteksyon sa Consumer - itinuturing na ang kahilingan ay nasa labas ng kagalingan nito.

Pangkalahatang tugon: dahil ang Ministry of Agriculture bilang benepisyaryo ng pag-aaral na ito ay nagbigay ng pahintulot nakapanghihina ng loob, ang kahilingan ng notification ay tinanggihan.

Nang isinasaalang-alang na ang mga kalaban pahintulot ay batay sa isang maling interpretasyon ng sining. huwag. 4 Directive 2001/18 / EC na ginagawa ibukod ang paggamit ng antibyotiko pagtutol gene para sa mga layunin ng pananaliksik, ngunit simula lamang sa 2008, Nagbigay kami ng apela kabilang ang Opinyon ng European Food Safety Authority (EFSA-Q-2003-109, pinagtibay: 02/04/2004) ayon sa kung saan ang npt II gene ay itinuturing na walang masamang epekto sa kalusugan ng tao at sa kapaligiran at may safe kasaysayan ng paggamit ng higit sa 13 taon.
Ang Ministry of Agriculture muling maisaalang-alang ang posisyon nito ng pagsunod sa aming apila at ipinadala ang isang kanais-nais na pahintulot sa Ministry of Environment sa Nobyembre 2006. Sa oras na nakuha namin kanais-nais na mga pahintulot mula sa lahat ng limang mga regulatory bodies ngunit hindi inaasahan, Ministry of Environment ay hindi aprubahan invoking isang pamamaraan error ng Romanian pangkontrol na pamamaraan. Nang wasto, Ministry of Environment ay pinagana na ang ordinansa walang 49/2000 magtadhana ang isang posibleng muling pagsasaalang-alang ng isang pahintulot na inisyu. Ito ay dahil pasalungat ang parehong ministeryo sa una tinanggap ang aming apila at ipapasa ito sa Ministry of Agriculture. Sa situasyon na ito, Ministry of Environment iminungkahing upang magsumite ng isang bagong aplikasyon. Noong Pebrero 2007 isang bagong aplikasyon ay isinumite. Noong Mayo 2007 lahat ng mga hakbang ng pamaraan pagsusuri ay Napagpasyahan ngunit ang permit ay maaantala. Noong Hulyo 2007, Ministry of Environment planed ng karagdagang pampublikong rehiyonal na debate. Nagpakita ng mga resulta ng lubos na nagkakaisa suporta mula sa mga interesadong mga kadahilanan.

Kahit na ang mga pamamaraan ng pagsusuri ay Napagpasyahan at lahat ng mga kinakailangang dokumento para sa pag-apruba ay nagpakita, Ministry of Environment maantala, nang walang pagbibigay-katarungan, ang paggawad ng mga permiso. Sa wakas, ang awtorisasyon hindi. 4/9 Nobyembre 2007 para sa isang bagong field na pagsubok sa C5 (hanggang sa 2011) ay nabigyan ngunit ipinataw ng mga karagdagang paghihigpit sa paggawa ng mga pang-eksperimentong pagsubok halos imposible upang isakatuparan ang. Isa sa mga paghihigpit ay tumutukoy sa ang katunayan na ang mga puno ay dapat na may proteksiyon takip sa panahon ng hindi aktibo. Ang makatwirang paliwanag para sa mga kinakailangan ay hindi malinaw dahil pagsubok sa field ay matagumpay at ligtas na natupad sa Espanya, Poland at Romania mula noong 1996 at ang ecological aspeto kaligtasan ng mga plantings ay nai-publish sa peer-reviewed journal at ipinakita sa file ng application. Dapat itong nabanggit din na ang kabuuang lugar ng "pinahintulutan" pagsubok lamang 400 m2 na sapat para sa humigit-kumulang na lamang 15 halaman ng C5 at 15 halaman ng maginoo cultivar.

Upang gawing mas makatwirang ang mga paghihigpit, -file kami ng petisyon sa National Agency para sa Proteksiyon ng Kapaligiran bilang karampatang mga Awtoridad at ipinakita argumento gamit ang data ng sanggunian at panitikan. Ang tugon ng karampatang mga Awtoridad ay na dapat naming magsumite ng bagong file ng application. Ito ay nagpapahiwatig ng mga karagdagang gastos at sumakop nang madaming oras.

Foregone Mga Benepisyo

Sharka ay may malubhang agronomic at pampulitikang kahihinatnan dahil sa napakalaking pagkalugi pang-ekonomiya. Panukala sa gaya ng kuwarentenas at pag-ubos ng mga nahawaang mga puno na di-napatutunayang upang maging sapat para pigilan ang tuloy-tuloy na pagkalat ng PPV, at ngayon maraming mga bansa ensayo magkakasamang buhay na may sakit sa kabila ng mabibigat na pagkalugi sa ilang mga kaso. Dahil sa mabilis na pagkalat ng PPV sa pamamagitan ng aphids at ang pagkakaroon ng maraming mga potensyal na host, Sakit Sharka ay mahirap matanggal kapag ito ay naging itinatag sa isang lugar. Samakatwid, ang paggamit ng mga lumalaban cultivars ay kumakatawan sa mga pinakamahalagang diskarte upang makontrol PPV. Ang paggamit ng mga likas na pinagkukunan ng paglaban ay mahalaga para sa pagbuo ng mga bagong uri ngunit ito ay mahirap at napakahabang upang isama ang naturang paglaban sa bato prutas uri sa pamamagitan ng maginoo pag-aanak.

Ang pagtutol ng C5 kaakit-akit ay namamana at nasasalin sa pamamagitan buto at maaaring madaling pinili at samakatuwid 'HoneySweet' ay maaaring magamit bilang isang magulang sa pag-aanak programa upang mabilis na piliin ang bagong lumalaban uri (Scorza et al., 1998; Ravelonandro et al., 2002). At saka, direct pagbabago ng kasalukuyang sikat o tradisyonal cultivars ay kasalukuyang isang opsyon sa ilang mga species Prunus.

Mga Larawan

Prutas ng C 5 transgenic clone (Honey Sweet) lumalaban sa PPV

Gastos ng Pananaliksik

na kukumpletuhin

Mga sanggunian – background sa pag-aaral kaso

Zagrai I., Ravelonandro M., Scorza R., Mnoiu N., Zagrai L., 2008isang. Field na paglabas sa transgenic plums sa Romania. Bulletin ng University of Sciences pang-agrikultura at Beterinaryo Medicine Cluj-Napoca, Hayop Agham at Biotechnologies. 65:358-365. ISSN 1843-5262.

Zagrai I., Kapote militar N., Ravelonandro M., M. House, Zagrai L., Scorza R., 2008b- Kaakit-akit pox virus silencing ng C5 transgenic plums ay matatag sa ilalim hamon pagbabakuna sa heterologous mga virus. Journal ng Plant Pathology, 90:63-71.

Zagrai I., Zagrai L., Ravelonandro M., Gaboreanu I., Pamfil D., B. Ferencz, O. Popescu, Scorza R., Hood, N. 2008c. Environmental Impact Assessment ng Transgenic Plums sa Pagkakaiba ng kaakit-akit POX Virus na populasyon. Acta Horticultuarae 781: 309-318.

Karagdagang mga sanggunian

Atanassov D., 1932. Kaakit-akit pox. Ang isang bagong virus sakit. Ann Univ. Sofia Faculty AG. Sih. 11: 49-69.

M. House, Kapote militar N., Myrta A., Llácer G., 2006. Kaakit-akit pox virus at tinatayang mga gastos na nauugnay sa sakit sharka. EPPO Bulletin / EPPO Bulletin 36:202-204.

Kapote militar N., M. House, Llácer G., Petter F., Platts L.G., Roy A.S., Smith I.M., 2006. Ang pagsusuri ng mga kaakit-akit pox virus / Une rebiyu du kaakit-akit pox virus. Sa: Toro. OEPP / EPPO Bull. 36 (2) : 201-349.

Kapote militar N., J. Perez-Panades, Monzo C., E. Carbonell, A. Urbanski, Scorza R., Ravelonandro M., M. House, 2008. Pagtatasa ng ang pagkakaiba-iba at dynamics ng kaakit-akit pox virus at dapurak populasyon sa transgenic plums European sa ilalim ng mga kondisyon Mediterranean. Transgenic Pananaliksik 17:367-377

Fuchs M., M. House, Kapote militar N., Jelkmann W., Kundu J., Laval V., Hammers G.P., Minafra A., Petrovic N., Pfieffer P., Mag-usisa Nocak M., Ravelonandro M., Sldarelli P., Stussi-Garaud C., E. puno ng ubas, Zagrai I., 2007. Kaligtasan ng pagtatasa ng transgenic plums at grapevines pagpapahayag ng viral mano gene protina: bagong pananaw sa tunay na epekto sa kapaligiran ng santaunan halaman ininhinyero para sa virus paglaban. Journal ng Plant Pathology 89: 5-12.

Malinowski T., M. House, Kapote militar N., Zawadzka B., Gorris M.T., Scorza R., Ravelonandro M., 2006. Mga pagsubok sa field ng kaakit-akit panggagaya transformed na may kaakit-akit pox virus mano protina (PPV-CP) gene. Planta ng Sakit 90:1012-1018.

Ravelonandro M., Scorza R., Bachelor J.C., Labonne G., Pagpataw L., Damsteegt V., Callahan ng umaga, Dunez J., 1997. Pagtutol ng transgenic Sirwelas sa kaakit-akit pox virus impeksiyon. Planta ng Sakit, 81: 1231-1235

Ravelonandro M., Briard P., Monsion M., Scorza R., 2002. Matatag na paglilipat ng mga kaakit-akit pox virus (PPV) capsid transgene sa seedlings ng dalawang Pranses cultivars 'Prunier d'Ente 303' at 'Quetsche 2906', at paunang mga resulta ng PPV hamon assays. Acta Hort. 577:91-96.

Scorza R., Ravelonandro M., Callahan ng umaga, Cordis J.M., Fuchs M., Dunez J., Gonsalves D., 1994. Transgenic plums (Sirwelas) ipahayag ang kaakit-akit pox lasong galing sa impeksyon pahiran protina gene. Plant Cell Repts. 14:18-22.

Scorza R., Callahan A., Pagpataw L., Damsteegt V., K. Webb, Ravelonandro M., 2001. Post-transcriptional gene silencing sa kaakit-akit pox virus lumalaban transgenic European kaakit-akit na naglalaman ng mga kaakit-akit pox potyvirus mano protina gene. Transgenic Pananaliksik 10: 201-209.

Scorza R., Callahan A., Pagpataw L., Damsteegt V., Ravelonandro M., 1998. Transfering potyvirus mano protina gene sa pamamagitan ng paghahalo ng lahi ng halaman transgenic upang makabuo ng kaakit-akit pox virus resistant plums (Sirwelas L.). Acta Horticulturae 472:421-425.

Principal Imbestigador

Zagrai I., Pananaliksik at Pagpapaunlad Station para sa Fruit Bistrita, Pag-aanak at Birolohiya lab., Bagong Dumitreei kalye kalsada, huwag 3, Bistrita, Rumanya. Email: izagrai@yahoo.com