Osnovne informacije in pomembne rezultate
virus Plum pox (PPV) je povzročitelj šarke, ena najbolj uničujočih bolezni Prunus vrst, povzroči velike agronomske in gospodarske izgube (House et al., 2006). Od prvega opisa v Bolgariji (Atanasoff, 1932), je virus razširil na velik del evropske celine, po Sredozemlju in na Bližnjem vzhodu, Južna in Severna Amerika (Čile, ZDA, Kanada, in Argentina) in Aziji (Kazahstan, Kitajska in Pakistan) (Capote sod., 2006). Uporaba odpornih kultivarjev predstavlja najbolj učinkovita rešitev za nadzor in vodenje PPV. Transgenska PPV odporen slive, C5 ("HoneySweet"), je bil razvit (Scorza sod., 1994) izkoriščanje posttranskripcijsko gen za dušenje zvoka (PTGS), zagotavlja visoko učinkovitega in uspešnega odpornost proti PPV (Ravelonandro sod., 1997; Scorza sod., 2001). Upor je izkazal trajne in stabilne več kot 10 let v poljskih poskusov v Črnem morju, Srednji in Zahodni evropske regije (Malinowski sod., 2006; Zagrai sod., 2008a). Poleg tega, presadek inokulacija C5 slive z več drugimi virusi na terenu in v rastlinjaku niso vplivali na stabilnost inženirstva odpornosti proti PPV več kot tri mirovanja obdobja (Zagrai sod., 2008b).
Transgenska C5 ("HoneySweet") slive so pokazale nobenega vpliva na sestavo populacij virusov in ne vpliva na neciljne organizme v daljšem časovnem obdobju (Fuchs et al., 2007; Capote sod., 2008; Zagrai sod., 2008c). Gibanje "HoneySweet" cvetni prah je omejena. Delo z "HoneySweet" je zagotovil nove vpoglede v uporabi PPV odpornih transgenih sliv in dokazal, da ni negativnih vplivov na okolje teh sliv. Te študije kažejo prednosti te tehnologije za nadzor širjenja PPV, bistveno izboljšanje proizvodnje slive na področju okužbe PPV, in da bi ohranjanje genetske raznolikosti slive na teh področjih.
Faza razvoja
Za izvajanje nadaljnjih poskusov na terenu s C5 transgene slive in pridobili več informacij v zvezi z agronomskih in fenotipa zmogljivosti in združljivosti tega dogodka pod PPV endemično območje in geo-klimatski pogoji Romunije, nova aplikacija datoteka je treba predložiti.
Razlogi za Block / Delay
v novembru 2005 datoteka Zahtevek je bil predložen ministrstvu za okolje v skladu z romunsko zakonodajo 214/2002, za izdajo dovoljenja za opravljanje poljskih poskusov z C5. februarja 2006 prošnja je bila zavrnjena z obrazložitvijo, da nova uredba je bila v teku za sprejem v tem času. V skladu z novo uredbo, poljske poskuse bilo prepovedano v 15 km iz naravnih zavarovanih območij. Datoteka predlog je bil zavrnjen, čeprav bi se povezava ne razlikovati med slive in obstoječih zavarovanih območij na 10, 11 in 12 km od naše lokacije mesta predlaganem področju. V tem času primerna lokacija brez zavarovanih območij bližje kot 15 km je bila ugotovljena in nova vloga datoteka je bila predložena v marcu 2006. Julija 2006 zgoraj navedena ureditev je spremenjena in predhodne meja 15 km od naravnega zaščitenega območja je bila spremenjena. V avgustu 2006 smo prejeli soglasja iz petih organov, pooblaščenih za oceno naše prijavne dokumentacije, kot sledi:
- Biološke varnosti komisija - ugodno soglasje
- Ministrstvo za kmetijstvo - neugodna soglasje. Razlog je prisotnost NPT II antibiotika markerski gen po katerem stroki. no. 4 z Direktivo 2001/18 / ES
- Nacionalni Sanitarna, Veterinarska in agencija za varnost hrane - ugodno soglasje
- Nacionalni urad za varstvo potrošnikov - šteje, da je zahtevek izven njene pristojnosti.
splošno odgovor: ker je Ministrstvo za kmetijstvo, kot je upravičenec te študije je dal negativno soglasje, zahtevek za priglasitev je bila zavrnjena.
Ob upoštevanju, da je neugoden soglasje temelji na napačni razlagi umetnosti. no. 4 Direktiva 2001/18 / ES, ki ne izključuje uporabe antibiotike odporni geni za raziskovalne namene, vendar le, začenši z 2008, smo izdali pritožbo, vključno z mnenjem Evropske agencije za varnost hrane (EFSA-Q-2003-109, sprejel: 02/04/2004) v skladu s katerim se npt II gen oceniti brez škodljivih učinkov na zdravje ljudi in okolje in ima varno zgodovino uporabe več kot 13 let.
Ministrstvo za kmetijstvo ponovno svoj položaj naslednje naše pritožbe in poslala pozitivno soglasje, da ministrstvo za okolje novembra 2006. V tem času smo pridobili ugodne soglasja vseh petih regulatornih organov, vendar nepričakovano, Ministrstvo za okolje ni odobrila se sklicuje na procesne napake romunske regulativnim postopkom. ravno, Ministrstvo za okolje je sklicevala, da odloka ne 49/2000 ne določajo možnosti ponovne preučitve soglasja že izdanega. To je protislovna, ker je isto ministrstvo najprej sprejelo našo pritožbo in ga posredovala ministrstvu za kmetijstvo. V tem primeru, Ministrstvo za okolje predlagal, naj predloži novo prijavo. februarja 2007 nova vloga je bila predložena. Maja 2007 so bili sklenjeni vse korake postopka ocenjevanja, ampak dovoljenje je bila odložena. Julija 2007, Ministrstvo za okolje načrtovano dodatno javno regionalno razpravo. Rezultati so pokazali, soglasno podporo zainteresiranih dejavnikov.
Čeprav je bil postopek ocenjevanja sklenjene in so bili predstavljeni vsi potrebni dokumenti za odobritev, Ministrstvo za okolje zamudo, brez utemeljitve, podelitev dovoljenja. Končno, dovoljenje ne. 4/9 November 2007 za novega poljskega poskusa s C5 (dokler 2011) je bila odobrena, vendar uvedel dodatne omejitve, zaradi česar poskusno sojenja skoraj nemogoče izvesti. Ena od omejitev se nanaša na dejstvo, da morajo imeti drevesa zaščitni pokrov v rastnem obdobju. Razlog za zahtevo, ni jasno, saj so poljske poskuse uspešno in varno izvesti v Španiji, Poljska in Romunija od leta 1996 in ekološke varnostni vidiki teh nasadov so bili objavljeni v strokovnih revijah in predstavljeni v obrazcu za prijavo. Omeniti je treba tudi, da je skupna površina "pooblaščeni" sojenja samo 400 m2, ki zadošča le približno 15 rastline C5 in 15 rastline za konvencionalne kultivarja.
Da bi se omejitve bolj smiselno, smo vložili peticijo na nacionalno agencijo za varstvo okolja, kot pristojnega organa in predstavil argumente uporabo referenčnih podatkov in literature. Odziv pristojnega organa je, da bi morali predložiti novo prijavo datoteko. To pomeni dodatne stroške in je dolgotrajen.
Izpad Prednosti
Šarke ima resne agronomske in politične posledice zaradi ogromne gospodarske izgube. Ukrepi, kot so karantena in izkoreninjenje okuženih dreves, so se izkazali za nezadostne za preprečitev nadaljnjega širjenja PPV, in danes številne države v praksi sožitje z boleznijo kljub velike izgube v nekaterih primerih. Zaradi hitrega širjenja PPV uši in prisotnosti številnih potencialnih gostiteljev, Šarke bolezen je težko izkoreniniti, ko je postala je sedež na območju. zato, uporaba odpornih sort predstavlja najpomembnejšo strategijo za nadzor PPV. Izkoriščanje naravnih virov odpornosti je pomembno za razvoj novih sort, vendar je težko in dolgotrajen vključiti tak odpor v kamnitih sort sadja skozi konvencionalne reje.
Odpornost C5 slive so dedne in prenaša preko semena in da se lahko izbrana in zato "HoneySweet" se lahko uporablja kot starš v rejskih programov za hitro izbiro nove odporne vrste (Scorza sod., 1998; Ravelonandro sod., 2002). Poleg tega, neposredno preoblikovanje trenutno priljubljenih in tradicionalnih sort je trenutno možnost pri nekaterih vrstah Prunus.
Slike
Sadovi C 5 transgeni klon (Honey Sweet) odporen na PPV
Stroški raziskav
treba izpolniti
Reference – Ozadje študije primera
Zagrai I., Ravelonandro M., Scorza R., Mnoiu N., Zagrai L., 2008a. sprostitev področju transgenih sliv v Romuniji. Bilten Univerze kmetijskih znanosti in veterinarstvo Cluj-Napoca, Znanost in Biotehnologija živali. 65:358-365. ISSN 1843-5262.
Zagrai I., Capote N., Ravelonandro M., M. House, Zagrai L., Scorza R., 2008b- virus Plum pox utišanje C5 transgenih sliv je stabilen pri challenge inokulacijo s heterolognim virusom. Revija za rastlinsko patologijo, 90:63-71.
Zagrai I., Zagrai L., Ravelonandro M., Gaboreanu I., Pamfil D., Ferencz B., Popescu O., Scorza R., Capote, N. 2008c. Presoja vplivov na okolje transgenih Slive o raznolikosti Plum pox Virus populacij. Acta Horticultuarae 781: 309-318.
Dodatne reference
Atanassov D., 1932. Plum pox. Nova bolezen virus. Ann Univ. Sofia Fakulteta Ag. Silv. 11: 49-69.
M. House, Capote N., Myrta A., Llácer G., 2006. virus Plum pox in ocenjene stroške, povezane s šarke bolezni. Bilten OEPP / EPPO Bulletin 36:202-204.
Capote N., M. House, Llácer G., Petter F., Platts L.G., Roy A.S., Smith i.m., 2006. Pregled virus Plum pox / Pregled virus Plum pox. V: Bull. OEPP / EPPO Bull. 36 (2) : 201-349.
Capote N., Perez-Panades J., Monzo C., Carbonell E., A. Urbaneja, Scorza R., Ravelonandro M., M. House, 2008. Ocenjevanje raznolikosti in dinamika virus Plum pox in populacije uši transgenih evropskih sliv pod sredozemskih pogoji. transgeni Raziskave 17:367-377
Fuchs M., M. House, Capote N., Jelkmann W., Kundu J., Laval V., Kladiva G.P., Minafra A., Petrovic N., Pfieffer P., Pump-Nocak Mr., Ravelonandro M., Sldarelli P., Stussi-Garaud C., Vigne E., Zagrai I., 2007. Ocena varnosti transgenih slive in vinske trte, ki izražajo virusni plaščni protein gene: nova spoznanja v resničnem vplivu na okolje trajnic inženirstva za odpornost proti virusom. Revija za rastlinsko patologijo 89: 5-12.
Malinowski T., M. House, Capote N., Zawadzka B., Gorris M.T., Scorza R., Ravelonandro M., 2006. Poljski poskusi slive klonov transformirana z Plum virusa koz ovojnega proteina (PPV-CP) gen. rastlin bolezni 90:1012-1018.
Ravelonandro M., Scorza R., Bachelor J.C., G. Labonne, Levy L., Damsteegt V., Callahan A.M., Dunez J., 1997. Odpornost transgenih Prunus domestica za okužbo z virusom koz slive. rastlin bolezni, 81: 1231-1235
Ravelonandro M., Briard P., Monsion M., Scorza R., 2002. Stabilno prenos virusa Plum pox (PPV) kapsidni transgenov za sadike "Prunier d'Ente 303" dveh francoskih sort in "Quetsche 2906", in predhodni rezultati PPV izziv testov. Acta Hort. 577:91-96.
Scorza R., Ravelonandro M., Callahan A.M., Srce J. M., Fuchs M., Dunez J., Gonsalves D., 1994. transgene slive (Prunus domestica) izražajo plum pox virus gen plaščni protein. Rastlinske celice Repts. 14:18-22.
Scorza R., Callahan A., Levy L., Damsteegt V., K. Webb, Ravelonandro M., 2001. Post-transkripcije gena za dušenje zvoka v virus Plum pox odporen Transgenska Evropska slive, ki vsebuje plum pox potyvirus gen plaščni protein. transgeni Raziskave 10: 201-209.
Scorza R., Callahan A., Levy L., Damsteegt V., Ravelonandro M., 1998. Prenosom potyvirus plaščni protein gene s hibridizacijo transgenih rastlin, da dobimo virus Plum pox odporne slive (Prunus domestica L.). Acta Horticulturae 472:421-425.
Principal Investigator
Zagrai I., Postaja za raziskave in razvoj za sadje Bistrita, Matična in Virology lab., Nova Dumitreei enosmerna ulica, no 3, Bistrita, Romunijo. E-mail: izagrai@yahoo.com