Bakgrundsinformation och relevanta resultat

Plommonkoppsvirus (PPV) är orsaksagenten till Sharka, en av de mest förödande sjukdomarna hos Prunus-arter, orsakar betydande agronomiska och ekonomiska förluster (Chamber et al., 2006). Sedan dess första beskrivning i Bulgarien (Atanasoff, 1932), viruset har spridit sig till en stor del av den europeiska kontinenten, runt Medelhavsområdet och Mellanöstern, Syd- och Nordamerika (Chile, USA, Kanada, och Argentina) och Asien (Kazakstan, Kina och Pakistan) (Capote et al., 2006). Användningen av resistenta sorter representerar den mest effektiva lösningen för PPV-kontroll och -hantering. Ett transgent PPV-resistent plommon, C5 ("HoneySweet"), har utvecklats (Scorza et al., 1994) utnyttjar post-transkriptionell gentystnad (PTGS), ger ett mycket effektivt och effektivt motstånd mot PPV (Ravelonandro et al., 1997; Scorza et al., 2001). Motståndet har visat sig hållbart och stabilt i mer än 10 år i fältförsök i Svarta havet, Mellan- och Västeuropa (Malinowski et al., 2006; Zagrai et al., 2008en). Dessutom, ympning av C5-plommon med flera andra virus i fält och i växthus har inte påverkat stabiliteten hos den tekniska resistensen mot PPV under tre viloperioder (Zagrai et al., 2008b).

Den transgena C5 ("HoneySweet") plommon har inte visat någon inverkan på sammansättningen av viruspopulationer och ingen inverkan på icke-målorganismer under en längre tidsperiod (Fuchs et al., 2007; Capote et al., 2008; Zagrai et al., 2008c). Rörelsen av "HoneySweet"-pollen är begränsad. Arbetet med "HoneySweet" har gett nya insikter om användningen av PPV-resistenta transgena plommon och visat bristen på negativ miljöpåverkan av dessa plommon. Dessa studier visar fördelarna med denna teknik för att kontrollera spridningen av PPV, för att avsevärt förbättra plommonproduktionen i områden med PPV-infektion, och att hjälpa till att upprätthålla den genetiska mångfalden hos plommon i dessa områden.

Utvecklingsstadium

För att genomföra ytterligare fältförsök med C5 transgena plommon och för att få mer information om den agronomiska och fenotypiska prestandan och kompatibiliteten för denna händelse under PPV endemiskt område och geoklimatiska förhållanden i Rumänien, en ny ansökningshandling ska lämnas in.

Skäl för Block / Delay

I november 2005 en ansökan lämnades in till miljöministeriet enligt rumänsk lag 214/2002, för beviljande av tillstånd att utföra fältförsök med C5. I februari 2006 Ansökan avslogs på grund av att en ny förordning väntade på antagande under tiden. Enligt den nya förordningen, Fältförsök var förbjudna inom 15 km från naturskyddade områden. Ansökningshandlingen avslogs, även om inget samband kunde dras mellan plommon och befintliga skyddsområden vid 10, 11 och 12 km från vårt föreslagna fältplatsläge. Under tiden en lämplig plats utan skyddade områden närmare än 15 km identifierades och en ny ansökningsfil lämnades in i mars 2006. I juli 2006 ovannämnda förordning ändrades och den tidigare gränsen på 15 km från naturskyddat område ändrades. I augusti 2006 Vi fick medgivanden från de fem organ som har befogenhet att bedöma vår ansökningsfil enligt följande:

  • Biosäkerhetskommission – positivt samtycke
  • Jordbruksministeriet – ogynnsamt samtycke. Anledningen var närvaron av npt II antibiotisk genmarkör enligt art. inga. 4 från direktiv 2001/18/EG
  • Nationell sanitet, Veterinary and Food Safety Authority – favorable consent
  • National Authority for Consumer Protection – considered that the request is outside of its competence.

General response: because the Ministry of Agriculture as beneficiary of this study gave unfavorable consent, the notification request was rejected.

Taking into account that the unfavorable consent was based on a wrong interpretation of art. inga. 4 Directive 2001/18/EC that does exclude the use of antibiotic resistance genes for research purposes, but only beginning with 2008, we issued an appeal including the Opinion of European Food Safety Authority (EFSA-Q-2003-109, adopted: 02/04/2004) according to which the npt II gene is considered without adverse effects on human health and the environment and has a safe history of use of more than 13 år.
Jordbruksministeriet omprövade sin ståndpunkt efter vårt överklagande och skickade ett positivt samtycke till miljöministeriet i november 2006. Vid den tiden fick vi positiva medgivanden från alla fem tillsynsorganen men oväntat, miljöministeriet godkände inte att man åberopade ett procedurfel i det rumänska föreskrivande förfarandet. Exakt, miljödepartementet har åberopat att förordningen nr 49/2000 föreskriver en eventuell omprövning av ett redan utfärdat samtycke. Detta är motsägelsefullt eftersom samma departement till en början accepterade vår överklagan och vidarebefordrade den till jordbruksministeriet. I denna situation, miljöministeriet föreslog att en ny ansökan skulle lämnas in. I februari 2007 en ny ansökan lämnades in. I maj 2007 alla steg i utvärderingsförfarandet avslutades men tillståndet försenades. I juli 2007, miljöministeriet planerade ytterligare en offentlig regional debatt. Resultaten visade enhälligt stöd från intresserade faktorer.

Även om utvärderingsförfarandet avslutades och alla nödvändiga dokument för godkännande presenterades, miljöministeriet försenat, utan motivering, beviljandet av tillståndet. Slutligen, bemyndigandet nr. 4/9 November 2007 för ett nytt fältförsök med C5 (tills 2011) beviljades men införde ytterligare begränsningar som gjorde experimentförsöket nästan omöjligt att genomföra. En av begränsningarna avser att träden ska ha ett skyddande täcke under den vegetativa perioden. Skälet till kravet är inte klart eftersom fältförsök har genomförts framgångsrikt och säkert i Spanien, Polen och Rumänien sedan dess 1996 och de ekologiska säkerhetsaspekterna av dessa planteringar har publicerats i peer-reviewed tidskrifter och presenterats i ansökningsfilen. Det bör också noteras att den totala arean för den "auktoriserade" prövningen endast är 400 m2 vilket räcker till endast ca 15 växter av C5 och 15 växter av den konventionella sorten.

För att göra begränsningarna mer rimliga, vi lämnade in en framställning till Naturvårdsverket som behörig myndighet och presenterade argument med hjälp av referensdata och litteratur. Den behöriga myndighetens svar var att vi skulle lämna in en ny ansökningsfil. Detta innebär extra kostnader och är tidskrävande.

Uteblivna Fördelar

Sharka har allvarliga agronomiska och politiska konsekvenser på grund av enorma ekonomiska förluster. Åtgärder som karantän och utrotning av infekterade träd har visat sig vara otillräckliga för att förhindra kontinuerlig spridning av PPV, och idag praktiserar många länder samexistens med sjukdomen trots stora förluster i vissa fall. På grund av den snabba spridningen av PPV av bladlöss och närvaron av många potentiella värdar, Sharkas sjukdom är svår att utrota när den väl har etablerat sig i ett område. Därför, användningen av resistenta sorter representerar den viktigaste strategin för att kontrollera PPV. Utnyttjandet av naturliga resistenskällor är viktigt för utvecklingen av nya sorter, men det är svårt och utdraget att införliva sådan resistens i stenfruktsorter genom konventionell förädling.

Resistensen hos C5 plommon är ärftlig och överförs genom frö och kan enkelt väljas och därför kan "HoneySweet" användas som förälder i avelsprogram för att snabbt välja nya resistenta typer (Scorza et al., 1998; Ravelonandro et al., 2002). Dessutom, direkt omvandling av för närvarande populära eller traditionella sorter är för närvarande ett alternativ i vissa Prunus-arter.

Bilder

Frukter av C 5 transgen klon (Honung söt) resistent mot PPV

Kostnad för forskning

ska fyllas

Referenser – bakgrund till fallstudie

Zagrai I., Ravelonandro M., Scorza R., Mnoiu N., Zagrai L., 2008en. Fältutsättning av transgena plommon i Rumänien. Bulletin of University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca, Djurvetenskap och bioteknik. 65:358-365. ISSN 1843-5262.

Zagrai I., Hood N., Ravelonandro M., Kammare M., Zagrai L., Scorza R., 2008b- Tystnad av plommonkoppsvirus av C5 transgena plommon är stabil under provokulationsympning med heterologa virus. Journal of Plant Pathology, 90:63-71.

Zagrai I., Zagrai L., Ravelonandro M., Gaborisk I., Pamphil D., Ferencz B., Popescu O., Scorza R., Capote, N. 2008c. Miljökonsekvensbedömning av transgena plommon på mångfalden av populationer av plommonkoppsvirus. Journal of Horticulture 781: 309-318.

Ytterligare referenser

Atanassov D., 1932. Plommonkoppor. En ny virussjukdom. Ann Univ. Sofia fakultet Ag. Skog. 11: 49-69.

Kammare M., Hood N., Myrta A., Lácer G., 2006. Plommonkoppsvirus och beräknade kostnader förknippade med hajsjukan. Bulletin OEPP/EPPO Bulletin 36:202-204.

Hood N., Kammare M., Lácer G., Petter F., Platts L.G., Roy A.S., Smith I.M., 2006. En recension av Plum pox virus/A review of Plum pox virus. I: Bull. EPPO/EPPO Bull. 36 (2) : 201-349.

Hood N., Perez-Panades J., Monzo C., Carbonell E., Urbaneja A., Scorza R., Ravelonandro M., Kammare M., 2008. Bedömning av mångfalden och dynamiken hos populationer av plommonkoppsvirus och bladlöss i transgena europeiska plommon under Medelhavsförhållanden. Transgen forskning 17:367-377

Fuchs M., Kammare M., Hood N., Jelkmann W., Kundu J., Laval V., Martelli G.P., Minafra A., Petrovic N., Pfieffer P., Pompe-Nocak M., Ravelonandro M., Sldarelli P., Stussi-Garaud C., Vigne E., Zagrai I., 2007. Säkerhetsbedömning av transgena plommon och vinrankor som uttrycker gener för virala pälsprotein: nya insikter om verklig miljöpåverkan från fleråriga växter konstruerade för virusresistens. Journal of Plant Pathology 89: 5-12.

Malinowski T., Kammare M., Hood N., Zawadzka B., Gorris M.T., Scorza R., Ravelonandro M., 2006. Fältförsök av plommonkloner transformerade med plommonkoppsvirushöljeproteinet (PPV-CP) gen. Växtsjuka 90:1012-1018.

Ravelonandro M., Scorza R., Kandidat J.C., Labonne G., Levy L., Damsteegt V., Callahan A.M., Dunez J., 1997. Resistens av transgena Prunus domestica till plommonkoppsvirusinfektion. Växtsjuka, 81: 1231-1235

Ravelonandro M., Briard P., Monsion M., Scorza R., 2002. Stabil överföring av plommonkoppsvirus (PPV) kapsid transgen till plantor av två franska sorter 'Prunier d'Ente 303' och 'Quetsche 2906', och preliminära resultat av PPV-utmaningsanalyser. Acta Hort. 577:91-96.

Scorza R., Ravelonandro M., Callahan A.M., Hjärta J.M., Fuchs M., Dunez J., Gonsalves D., 1994. Transgena plommon (Prunus domestica) uttrycka plommonkoppor virus pälsproteingenen. Plant Cell Repts. 14:18-22.

Scorza R., Callahan A., Levy L., Damsteegt V., Webb K., Ravelonandro M., 2001. Post-transkriptionell gentystnad in plommonkoppsvirus resistenta transgena europeiska plommon som innehåller plommonkoppor potyvirus pälsproteingen. Transgen forskning 10: 201-209.

Scorza R., Callahan A., Levy L., Damsteegt V., Ravelonandro M., 1998. Överföring av potyvirushöljeproteingener genom hybridisering av transgena växter för att producera plommonkoppsvirusresistenta plommon (Prunus domestica L.). Journal of Horticulture 472:421-425.

Ansvarig forskare

Zagrai I., Forsknings- och utvecklingsstationen för Bistrita fruktkultur, Avels- och virologilabb., Drumul Dumitrei Nou gatan, inga 3, Bistrica, Rumänien. E-post: izagrai@yahoo.com