Позадина информации и релевантни резултати
Вирусот на сипаници од слива (ППВ) е предизвикувачкиот агенс на Шарка, една од најразорните болести на видовите Prunus, предизвикувајќи значајни агрономски и економски загуби (Комората и сор., 2006). Од нејзиниот прв опис во Бугарија (Атанасоф, 1932), вирусот се прошири на голем дел од европскиот континент, околу медитеранскиот басен и Блискиот Исток, Јужна и Северна Америка (Чиле, САД, Канада, и Аргентина) и Азија (Казахстан, Кина и Пакистан) (Капоте и сор., 2006). Употребата на отпорни сорти е најефективното решение за контрола и управување со PPV. Трансгенична слива отпорна на PPV, C5 („Слатко мед“), е развиена (Скорза и сор., 1994) искористување на пост-транскрипциското замолчување на гените (PTGS), обезбедувајќи високо ефикасен и ефективен отпор против PPV (Равелондро и сор., 1997; Скорза и сор., 2001). Отпорот се покажа издржлив и стабилен повеќе од 10 години на теренски испитувања во Црното Море, Средни и западноевропски региони (Малиновски и сор., 2006; Заграи и сор., 2008на). Во прилог, графт-инокулацијата на C5 слива со неколку други вируси на терен и во стаклена градина не влијаеше на стабилноста на инженерската отпорност на PPV во текот на три периоди на мирување (Заграи и сор., 2008б).
Трансгенскиот C5 („Слатко мед“) сливата не покажа никакво влијание врз составот на популациите на вирусот и нема влијание врз нецелните организми во подолг временски период (Фукс и сор., 2007; Капоте и сор., 2008; Заграи и сор., 2008в). Движењето на поленот „HoneySweet“ е ограничено. Работата со „HoneySweet“ обезбеди нови сознанија за употребата на трансгенски сливи отпорни на PPV и го покажа недостатокот на негативни влијанија врз животната средина на овие сливи.. Овие студии укажуваат на предностите на оваа технологија за контрола на ширењето на PPV, значително да го подобри производството на слива во областите на инфекција со ППВ, и да помогне во одржувањето на генетската разновидност на сливата во овие области.
Фаза на развој
Со цел да се спроведат понатамошни теренски испитувања со C5 трансгенска слива и да се добијат повеќе информации во врска со агрономските и фенотипските перформанси и компатибилноста на овој настан под PPV ендемска област и гео-климатски услови на Романија, треба да се поднесе нова пријава.
Причините за Забрани / губеа
Во ноември 2005 до Министерството за животна средина е поднесено досие за апликација според романскиот закон 214/2002, за давање овластување за вршење на теренски испитувања со C5. Во февруари 2006 барањето е одбиено со образложение дека во меѓувреме се чека на донесување нов пропис. Според новата регулатива, теренските испитувања беа забранети на 15 километри од природни заштитени подрачја. Досието за апликација беше одбиено, иако не можеше да се направи врска помеѓу сливата и постоечките заштитени подрачја на 10, 11 и 12 км од нашата предложена локација на теренот. Во меѓувреме соодветна локација без заштитени подрачја поблиску од 15 км беше идентификуван и во март беше поднесена нова пријава 2006. Во јули 2006 горенаведената регулатива беше изменета и претходната граница на 15 км од природно заштитено подрачје беше изменето. Во август 2006 ги добивме согласностите од петте тела овластени да го проценат нашето досие за апликација на следниов начин:
- Комисија за биосигурност – поволна согласност
- Министерство за земјоделство – неповолна согласност. Причината беше присуството на антибиотски генски маркер npt II според чл. бр. 4 од Директивата 2001/18/ЕЗ
- Национален санитарен, Veterinary and Food Safety Authority – favorable consent
- National Authority for Consumer Protection – considered that the request is outside of its competence.
General response: because the Ministry of Agriculture as beneficiary of this study gave unfavorable consent, the notification request was rejected.
Taking into account that the unfavorable consent was based on a wrong interpretation of art. бр. 4 Directive 2001/18/EC that does exclude the use of antibiotic resistance genes for research purposes, but only beginning with 2008, we issued an appeal including the Opinion of European Food Safety Authority (EFSA-Q-2003-109, adopted: 02/04/2004) according to which the npt II gene is considered without adverse effects on human health and the environment and has a safe history of use of more than 13 години.
Министерството за земјоделство го преиспита својот став по нашиот апел и во ноември испрати поволна согласност до Министерството за животна средина. 2006. Во тоа време добивме поволни согласности од сите пет регулаторни тела, но неочекувано, Министерството за животна средина не одобри да се повика на процедурална грешка на романската регулаторна процедура. Точно, Министерството за животна средина се повика дека Уредбата бр 49/2000 предвидува можно преиспитување на веќе издадената согласност. Ова е контрадикторно бидејќи истото министерство првично ја прифати нашата жалба и ја препрати до Министерството за земјоделство. Во оваа ситуација, Министерството за животна средина предложи да се поднесе ново барање. Во февруари 2007 поднесена е нова апликација. Во мај 2007 сите чекори од постапката за евалуација беа завршени, но дозволата беше одложена. Во јули 2007, Министерството за животна средина планира дополнителна јавна регионална дебата. Резултатите покажаа едногласна поддршка од заинтересираните фактори.
Иако постапката за евалуација беше завршена и беа презентирани сите потребни документи за одобрување, Министерството за животна средина одложи, без оправдување, доделувањето на дозволата. Конечно, овластувањето бр. 4/9 Ноември 2007 за ново тестирање на терен со C5 (до 2011) беше одобрено, но наметнаа дополнителни ограничувања што го прави експерименталното испитување речиси невозможно да се спроведе. Едно од ограничувањата се однесува на фактот дека дрвјата мора да имаат заштитна покривка во текот на вегетативниот период. Образложението за барањето не е јасно бидејќи теренските испитувања се успешно и безбедно спроведени во Шпанија, Полска и Романија оттогаш 1996 и еколошките безбедносни аспекти на овие насади се објавени во рецензирани списанија и претставени во датотеката за апликација. Исто така, треба да се забележи дека вкупната површина на „овластеното“ судење е само 400 м2 што е доволно само за приближно 15 растенија од C5 и 15 растенија од конвенционалната сорта.
Со цел ограничувањата да бидат поразумни, поднесовме петиција до Националната агенција за заштита на животната средина како надлежен орган и презентиравме аргументи користејќи референтни податоци и литература. Одговорот на Надлежниот орган беше дека треба да поднесеме нова пријава. Ова подразбира дополнителни трошоци и одзема многу време.
Неминовен Предности
Шарка има сериозни агрономски и политички последици поради огромните економски загуби. Мерките како карантин и искоренување на заразените дрвја се покажаа како недоволни за да се спречи континуираното ширење на PPV, а денес многу земји практикуваат коегзистенција со болеста и покрај големите загуби во некои случаи. Поради брзото ширење на PPV од вошките вошки и присуството на многу потенцијални домаќини, Болеста на Шарка е тешко да се искорени откако ќе се воспостави во некоја област. Затоа, употребата на отпорни сорти претставува најважната стратегија за контрола на PPV. Употребата на природни извори на отпорност е важна за развојот на нови сорти, но тешко и долго е да се инкорпорира таква отпорност во сортите коскесто овошје преку конвенционално одгледување..
Отпорот на сливата C5 е наследен и се пренесува преку семе и може лесно да се избере и затоа „HoneySweet“ може да се користи како родител во програмите за размножување за брзо избирање на нови отпорни типови (Скорза и сор., 1998; Равелондро и сор., 2002). Во прилог, директна трансформација на моментално популарните или традиционалните сорти во моментов е опција кај некои видови Prunus.
Слики

Плодовите на Ц 5 трансгенски клон (Мед слатко) отпорен на PPV
Трошоците за истражување
да биде завршен
Референци – позадина на студија на случај
Заграј И., Равелондро М., Скорза Р., Мноиу Н., Заграј Л., 2008на. Теренско ослободување на трансгенски сливи во Романија. Билтен на Универзитетот за земјоделски науки и ветеринарна медицина Клуж-Напока, Наука за животни и биотехнологии. 65:358-365. ISSN 1843-5262.
Заграј И., Худ Н., Равелондро М., Комората М., Заграј Л., Скорза Р., 2008б- Замолчувањето на C5 трансгенските сливи е стабилно при предизвик инокулација со хетерологни вируси. Весник за патологија на растенијата, 90:63-71.
Заграј И., Заграј Л., Равелондро М., Габорец И., Памфил Д., Ференц Б., Попеску О., Скорза Р., Капоте, Н.. 2008в. Оцена на влијанието врз животната средина на трансгенските сливи врз разновидноста на популациите на вирусот на сливата сипаница. Весник за хортикултура 781: 309-318.
Дополнителни референци
Атанасов Д., 1932. Слива сипаница. Нова вирусна болест. Ен Унив. Софија Факултет Аг. Шума. 11: 49-69.
Комората М., Худ Н., Мирта А., Ласер Г., 2006. Вирусот на сипаница на слива и проценетите трошоци поврзани со болеста шарка. Билтен ОЕПП/ЕППО Билтен 36:202-204.
Худ Н., Комората М., Ласер Г., Петер Ф., Платс Л.Г., Рој А.С., Смит И.М., 2006. Преглед на вирусот на сипаници од слива/Преглед на вирусот на сипаница од слива. Во: Бик. EPPO/EPPO Bull. 36 (2) : 201-349.
Худ Н., Перез-Панадес Ј., Монцо Ц., Карбонел Е., Урбанеја А., Скорза Р., Равелондро М., Комората М., 2008. Проценка на различноста и динамиката на популациите на вирусот на слива и вошката вошка во трансгенски европски сливи во медитерански услови. Трансгенско истражување 17:367-377
Фукс М., Комората М., Худ Н., Јелкман В., Кунду Ј., Лавал В., Мартели Г.П., Минафра А., Петровиќ Н., Фајфер П., Помпе-Ночак М., Равелондро М., Слдарели П., Стуси-Гаро Ц., Вињ Е., Заграј И., 2007. Проценка на безбедноста на трансгенски сливи и винова лоза кои изразуваат гени на вирусни протеински обвивки: нови сознанија за вистинското влијание врз животната средина на повеќегодишните растенија дизајнирани за отпорност на вируси. Весник за патологија на растенијата 89: 5-12.
Малиновски Т., Комората М., Худ Н., Завацка Б., Горрис М.Т., Скорза Р., Равелондро М., 2006. Теренски испитувања на клонови на слива трансформирани со протеинот на обвивката од вирусот на слива (PPV-CP) ген. Растителна болест 90:1012-1018.
Равелондро М., Скорза Р., Дипломиран Џ., Лабоне Г., Леви Л., Дамстигт В., Калахан А.М., Дунез Ј., 1997. Отпорност на трансгенски Prunus domestica до инфекција со вирусот на сипаница. Растителна болест, 81: 1231-1235
Равелондро М., Бриард П., Монсион М., Скорза Р., 2002. Стабилен трансфер на вирусот на сипаница (ППВ) капсиден трансген на садници од две француски сорти „Prunier d’Ente 303“ и „Quetsche 2906“, и прелиминарните резултати од тестовите за предизвикување PPV. Акта Хорт. 577:91-96.
Скорза Р., Равелондро М., Калахан А.М., Срцето Ј.М., Фукс М., Дунез Ј., Гонсалвес Д., 1994. Трансгенски сливи (Prunus domestica) изрази го слива сипаница вирус ген за протеин на обвивката. Растителни клетки Repts. 14:18-22.
Скорза Р., Калахан А., Леви Л., Дамстигт В., Веб К., Равелондро М., 2001. Пост-транскрипциско замолчување на гените во вирус на сипаница на слива отпорна трансгенска европска слива која содржи слива сипаница Потивирусен ген за протеин на обвивката. Трансгенско истражување 10: 201-209.
Скорза Р., Калахан А., Леви Л., Дамстигт В., Равелондро М., 1998. Пренесување на протеински гени на потивирус преку хибридизација на трансгенски растенија за производство на сливи отпорни на вирусот на слива (Prunus domestica Л.). Весник за хортикултура 472:421-425.
Главен истражувач
Заграј И., Истражувачко-развојна станица за овошна култура Бистрита, Лабораторија за размножување и вирусологија., Улица Друмул Думитреи Ноу, бр 3, Бистрица, Романија. Е-пошта: izagrai@yahoo.com
